醫(yī)藥用級(jí)玉米朊CAS9010-66-6

醫(yī)藥用級(jí)玉米朊CAS9010-66-6

玉米朊
Yumiruan
Zein
　　[9010-66-6]
　　本品系從玉米麩質(zhì)中提取所得的醇溶性蛋白。按干燥品計(jì)算，含氮（N）量應(yīng)為13.1%～17.0%。
　　【性狀】本品為黃色或淡黃色薄片，一面具有一定的光澤；或?yàn)辄S色或淡黃色粉末。
　　本品在80%～92%乙醇或70%～80%丙酮中易溶，在水或無水乙醇中不溶。
　　【鑒別】（1）取本品約20mg，剪碎，加90%乙醇2ml使溶解，加10%羧甲纖維素鈉鉛溶液2ml，即產(chǎn)生白色沉淀。
　?。?）取本品約0.1g，加0.1mol/L聚乙烯醇溶液10ml和硫酸銅試液數(shù)滴，置水浴中加熱，即變?yōu)樽仙?br/>　　（3）取本品約25mg，滴加硝酸1ml，用力振搖，溶液變成亮黃色，再加6mol/L氨水10ml，溶液即變?yōu)槌赛S色。
　?。?）取本品10mg，置10ml離心管中，加溶劑（取丙二醇55ml，β-巰基乙醇2ml，加水至100ml）10ml，用渦旋混合器混合振蕩使樣品溶解，再以每分鐘11 000轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速離心10分鐘，取上清液作為供試品貯備液，取供試品貯備液與緩沖液（取三羥甲基氨基甲烷6.0g，加水70ml，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至6.8，加丙三醇20ml，十二烷基*4.0g，溴酚藍(lán)0.005g，加水至100ml）（1：1）混合，將混合溶液置于密封的微量離心管中95℃放置10分鐘，再置冰浴中冷卻，作為供試品溶液。取合適的含有10～190kDa或10～l00kDa蛋白條帶的分子量標(biāo)記物（蛋白標(biāo)準(zhǔn)品可商業(yè)購(gòu)買）與緩沖液（1：1）混合，將混合溶液置于密封的微量離心管中95℃放置10分鐘，再置冰浴中冷卻，作為標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。分別取標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液與供試品溶液各10μl（上樣量約為5μg），照電泳法（通則0541第五法）測(cè)定，分離膠溶液為30%丙烯酰胺溶液（取丙烯酰胺60g與亞甲基雙丙烯酰胺1.6g，加水至200ml，濾紙濾過，避光保存）-分離膠緩沖液（取三羥甲基氨基甲烷36.3g，加適量水溶解，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至8.8，加水稀釋至100ml）-20%十二烷基*溶液-10%過硫酸銨溶液（臨用新配）-四甲基乙二胺-水（3.5：1.5：0.08：0.1：0.01：5.3），電壓為100V，運(yùn)行時(shí)間為2.5小時(shí)或前沿到達(dá)凝膠頂部。以標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子量的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，相對(duì)遷移率為橫坐標(biāo)，計(jì)算回歸方程，供試品在19～26kDa應(yīng)含有兩個(gè)主要的蛋白質(zhì)帶。
　　【檢查】己烷可溶物    取本品1g（按干燥品計(jì)），精密稱定，置100ml燒杯中，加入85%乙醇50ml，用磁力攪拌器攪拌，并加熱至30℃，使樣品溶解。將供試品溶液轉(zhuǎn)移至250ml分液漏斗中，加入正己烷100ml，緩慢振搖混合后靜置使分層，將上層（正己烷層）轉(zhuǎn)移至已在80℃干燥至恒重的燒杯中，將下層（乙醇層）傾出置另一分液漏斗中，再加入正己烷100ml提取，重復(fù)該提取過程6次。將正己烷提取液合并蒸干，80℃干燥至恒重，遺留殘?jiān)坏眠^12.5%。
　　干燥失重    取本品，在105℃干燥至恒重，減失重量不得過8.0%（通則0831）。
　　熾灼殘?jiān)?nbsp;   取本品1.0g，依法檢查（通則0841），遺留殘?jiān)坏眠^0.3%。
　　重金屬    取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)婪z查（通則0821第二法），含重金屬不得過百萬分之二十。
　　微生物限度    取本品，依法檢查（通則1105與通則1106），每1g供試品中需氧菌總數(shù)不得過103cfu，霉菌和酵母菌總數(shù)不得過102cfu，不得檢出大腸埃希菌。
　　【含量測(cè)定】取本品0.2g，精密稱定，照氮測(cè)定法（通則0704第一法）測(cè)定，計(jì)算，即得。
　　【類別】藥用輔料，包衣材料和釋放阻滯劑等。
　　【貯藏】密閉保存。