抗肌肉特異受體酪胺酸酶抗體檢測(cè)試劑盒（肌無(wú)力試劑盒），用于抗musk抗體檢測(cè)，國(guó)內(nèi)部分科研項(xiàng)目用同款

抗肌肉特異受體酪胺酸激酶抗體又稱(chēng)為抗musk抗體，這款檢測(cè)試劑盒用于重癥肌無(wú)力的分癥和程度評(píng)價(jià)，德國(guó)IBL品牌的ELISA試劑盒在內(nèi)科疾病的診斷和評(píng)估方面有定量檢測(cè)，特異好靈敏度高的優(yōu)勢(shì)，科潤(rùn)達(dá)生物提供技術(shù)支持。現(xiàn)國(guó)內(nèi)部分三甲醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科應(yīng)用的就是科潤(rùn)達(dá)生物代理的肌無(wú)力試劑盒。

【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng)：肌肉特異性受體酪氨@酸激酶自身抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名稱(chēng)：MuSK-Ab ELISA

【產(chǎn)品規(guī)格】

96T

【預(yù)期用途】

試劑盒可定性和定量檢測(cè)人血清中肌肉特異性受體酪氨@酸激酶自身抗體。

【前言簡(jiǎn)介】

診斷重癥肌無(wú)力最有力的證據(jù)是病人由于免疫系統(tǒng)功能紊亂，產(chǎn)生針對(duì)自身肌肉神經(jīng)終板突觸后膜乙酰旦堿受體的自體抗體。診斷依據(jù)有臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查、血清學(xué)檢查以及診斷性治療等。證明重癥肌無(wú)力是自身免疫性疾病的臨床證據(jù)基于肌無(wú)力與疫苗注射、蚊蟲(chóng)叮咬、感染及創(chuàng)傷的聯(lián)系，及其與其他自身免疫性疾病如甲狀腺功能減退、系統(tǒng)性紅斑狼瘡和多發(fā)性肌炎之間的關(guān)聯(lián)。但是，10—20%的廣義重癥肌無(wú)力病人和多達(dá)50%的眼肌型重癥肌無(wú)力患者無(wú)法檢測(cè)到乙酰但堿受體抗體。這種情況通常被稱(chēng)為血清反應(yīng)陰性的重癥肌無(wú)力。血清反應(yīng)陰性的重癥肌無(wú)力已被認(rèn)為是一種抗體介導(dǎo)的疾病。

對(duì)于重癥肌無(wú)力病人而言，也許最重要的血清學(xué)檢查是抗乙酰旦堿受體的IgG抗體。臨床診斷為重癥肌無(wú)力的病人中大約有70%~95%該抗體檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，這也是該病出現(xiàn)虛弱和易疲勞癥狀的原因。如果能夠使動(dòng)物對(duì)乙酰旦堿受體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，那么動(dòng)物很容易出現(xiàn)重癥肌無(wú)力。實(shí)驗(yàn)性重癥肌無(wú)力通常在對(duì)受體產(chǎn)生免疫反應(yīng)2~3周內(nèi)出現(xiàn)，并具人類(lèi)重癥肌無(wú)力的所有特征。

對(duì)免疫系統(tǒng)的操作都會(huì)引起重癥肌無(wú)力病情的這一變化，從而證實(shí)了該病為自身免疫源性疾病。胸腺切除術(shù)以及磷環(huán)酰胺、PO尼松和血漿置換等能夠在一定程度上減低過(guò)強(qiáng)的自身免疫反應(yīng)，是具有一定效果的治療手段.

骨骼肌特異性受體酪@氨酸激酶抗體（MuSK-Ab）已證實(shí)存在于廣義的血清反應(yīng)陰性的重癥肌無(wú)力病人的血清中（大約40%血清反應(yīng)陰性的MG病人）。MuSK是一種集聚蛋白受體復(fù)合物的一部分并且在突觸形成過(guò)程中誘導(dǎo)乙酸但堿受體的聚集，而且Musk也在成熟神經(jīng)肌肉接點(diǎn)（NMJ）表達(dá)。Musk MG病人大多數(shù)為女性，有顯著的頭顱和累及延髓與其他形式的MG相比會(huì)有更高的風(fēng)險(xiǎn)。疾病的發(fā)作往往在早期，大多數(shù)病人在30-40歲出現(xiàn)癥狀。檢測(cè)MuSK抗體非常有助于MG診斷分型，預(yù)防胸腺誤切，和臨床管理MG病人。

【檢測(cè)原理】

抗肌肉特異受體酪胺酸酶抗體檢測(cè)試劑盒這款試劑盒是利用固相酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試驗(yàn)（ELISA）。包被孔中包被了抗原。病人樣本中的抗體結(jié)合包被孔中的抗原，并通過(guò)信號(hào)放大系統(tǒng)檢測(cè)出來(lái)。顯色反應(yīng)是通過(guò)結(jié)合到抗體的堿性磷酸酶催化的。生成的顏色強(qiáng)度與樣本中相應(yīng)抗體濃度成正比關(guān)系。定性或者定量結(jié)果分別通過(guò)臨界質(zhì)控或者標(biāo)準(zhǔn)曲線得到。

【試劑盒組成成分】

微孔板          12×8

包被有高度純化的重組MuSK蛋白

酶聯(lián)物         1×0.25ml

含堿性磷酸酶標(biāo)記的特異性抗體

抗血清         1×13ml

含抗人免疫蛋白物、穩(wěn)定劑

標(biāo)準(zhǔn)品A~E      5×12ml

即用型 濃度0、0.4、2.5、5、12U/ml

陽(yáng)性質(zhì)控        1×1.2ml

紅色 即用型

陰性質(zhì)控        1×1.2ml

綠色 即用型

分析緩沖液     1×120ml

紅色 即用型

洗滌液          1×100ml

10倍濃縮

底物液          1×13ml

即用型 含PNPP

終止液          1×15ml

含1M NaOH、0.25M EDTA

封板紙          4張

說(shuō)明書(shū)          1份

需要的材料（未提供）

1) 移液器，體積5、10、20、50、100、1000ul

2) 一次性的玻璃管(12×75mm)

3) 聚丙烯（PP）管（例如Sarstedt）

4) 旋渦混合器

5) 溫育箱，37℃

6) 8通道的移液器，帶加樣槽

7) 洗瓶、自動(dòng)或者半自動(dòng)洗板機(jī)

8) 酶標(biāo)儀

9) 雙蒸水或去離子水

10) 吸水紙、吸嘴和秒表

【儲(chǔ)存條件】

試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開(kāi)封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。

【檢測(cè)步驟】

1) 移取100ul的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和稀釋的病人樣本至相應(yīng)的微孔中，蓋板。

2) 在定軌搖床上（500rpm）室溫（18-25℃）溫育60分鐘。

3) 棄去孔中溶液。使用稀釋的洗滌液每次250ul洗板3次，在吸水紙上拍干。

4) 每孔加入100ul抗血清，蓋板。

5) 在定軌搖床上（500rpm）室溫（18-25℃）溫育60分鐘。

6) 棄去孔中溶液。使用稀釋的洗滌液每次250ul洗板3次，在吸水紙上拍干。

7) 每孔加入100ul已稀釋的酶聯(lián)物，蓋板。

8) 在定軌搖床上（500rpm）室溫（18-25℃）溫育60分鐘。

9) 棄去孔中溶液。使用稀釋的洗滌液每次250ul洗板3次。在吸水紙上拍干。

10) 加底物液和終止液建議使用8通道移液器。移取底物液和終止液應(yīng)該為相同的時(shí)間間隔。避免氣泡的生成。

11) 每孔加入100ulPNPP底物液。輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板混勻溶液。

12) 在室溫（18-25℃）溫育30分鐘。

13) 每孔加入100ul PNPP終止液終止顯色反應(yīng)。輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板混勻溶液。

14) 在405nm處檢測(cè)吸光度（參考波長(zhǎng)為600—650nm），應(yīng)在加入終止液后60分鐘內(nèi)讀數(shù)。

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