美國(guó)NOVABIOS恙蟲病IgG抗體 ELISA檢測(cè)試劑

美國(guó)NOVABIOS恙蟲病IgG抗體 ELISA檢測(cè)試劑

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【預(yù)期用途】

恙蟲病IgG ELISA試劑盒可用來檢測(cè)人是否感染恙蟲病東方螺旋體（OT），它是檢測(cè)血漿或血清中抗恙蟲病東方螺旋體源性重組抗原的IgG抗體的一種ELISA檢測(cè)系統(tǒng)。此實(shí)驗(yàn)可輔助診斷人是否感染了恙蟲病東方螺旋體，此試劑盒不能用于篩查血液或血液成分，僅供體外診斷用。

【檢測(cè)原理】

恙蟲病IgG ELISA試劑盒是一種定量檢測(cè)人血清和血漿中抗OT IgG抗體的酶免試劑。包被板的微孔中包被了重組抗原混合物（如下）。在檢測(cè)的時(shí)候，血清應(yīng)當(dāng)用Inbios的樣品稀釋液稀釋后再加入微孔中，具體請(qǐng)見如下的“血清應(yīng)用范例”。在溫育并洗板后，在微孔中加入HRP標(biāo)記的IgG酶聯(lián)物。溫育并洗板，再向微孔中加入TMB底物液并溫育。后再加入酸性終止液，并在450nm檢測(cè)底物反應(yīng)的程度。所檢測(cè)到的OD值與樣品中IgG抗體的濃度成正比。陰性質(zhì)控和弱陽性質(zhì)控以內(nèi)在質(zhì)控形式提供，其目的是為了監(jiān)測(cè)試劑盒成分的完整性。如果樣品與抗原間發(fā)生了反應(yīng)，則樣品應(yīng)當(dāng)被認(rèn)為是陽性的。

【檢測(cè)步驟】

將所有的試劑成分和樣品都平衡至室溫。實(shí)驗(yàn)前反復(fù)倒置以便試劑和樣品混合均勻。陽性質(zhì)控、陰性質(zhì)控和未知血清都必須做雙份檢測(cè)。

1） 確定好所需檢驗(yàn)的血清樣品量。

2） 按照如下的“血清應(yīng)用范例”組織血清樣品（僅供參考，用戶也可以自己設(shè)置相應(yīng)的位置），用戶可以雜試管或ELISA塑料板內(nèi)稀釋樣品。

3） 用樣品稀釋液將樣品稀釋50倍（您可以在8ul的血清中加入392ul樣品稀釋液），混合。注意：血清和質(zhì)控品不能低于4ul。

4） 用移液器將稀釋好的血清和質(zhì)控各50ul加入到相應(yīng)的微孔中。

5） 用封板膠僅在開放的微孔表面封板，所有板條的底部是沒有覆蓋的。

注意：這樣是為了保證溫度的分布在每個(gè)孔的底部和血緣相等地散播。一旦頂部密封阻礙了蒸發(fā)，任何多余的封板膠必需被剪掉。

6） 37℃下保濕溫育板條30分鐘，在溫育器的底部放置水浴箱可達(dá)濕潤(rùn)的作用。注意：不要將微孔板疊放，必須單獨(dú)地分層平輔。這對(duì)于溫度的平等分布非常重要。不要使用CO2或任何氣體，不要讓板條接觸任何濕潤(rùn)的物質(zhì)，如濕紙巾等。

7） 溫育后，用洗板機(jī)洗板6次，每次每孔300ul。

8） 在每一微孔中加入50ul即用型的酶聯(lián)物。

9） 用封板膠僅在開放的微孔表面封板，所有板條的底部是沒有覆蓋的。（同步驟5）

10） 37℃下保濕溫育板條30分鐘。（同步驟6）

11） 溫育后，用洗板機(jī)洗板6次，每次每孔300ul。

12） 用多道移液器在每一微孔中加入150ul Enwash溶液。

13） 室溫溫育5分鐘。

14） 溫育后，用洗板機(jī)洗板6次，每次每孔300ul。

15） 用多道移液器在每一微孔中加入75ul TMB底物液。

16） 室溫避光溫育10min。

17） 溫育后，用多道移液器在每一微孔中加入50ul終止液，室溫溫育1min。

18） 溫育后，450nm處測(cè) OD值。

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