溫州魚(yú)皮膠原蛋白肽生產(chǎn)線*

采用酶法提取膠原蛋白時(shí)，必須嚴(yán)格控制提取條件。

首先，酶作用時(shí)間必須適當(dāng)。如果時(shí)間過(guò)短，膠原蛋白，就不能充分釋放到提取液中，影響提取率；如果酶作用時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，膠原蛋白會(huì)水解過(guò)度，產(chǎn)生過(guò)多的苦味小分子低聚肽，不僅會(huì)增加分離純化的難度，也會(huì)影響膠原 蛋白的功能特性和生物活性。

其次，酶解溫度要適宜。溫度過(guò)低，酶的作用效果不明顯；溫度過(guò)高會(huì)引起酶的失活和膠原蛋白的變性。據(jù)報(bào)道，當(dāng)介質(zhì)pH略低于中 性時(shí)，膠原蛋白的變性溫度為40～41℃，當(dāng)介質(zhì)pH為酸性時(shí)，膠原蛋白的變性溫度為38～39℃，而且魚(yú)皮膠原蛋白的變性溫度要比豬皮膠原蛋白的變性溫 度低7～12℃。所以，如果要使提取的膠原蛋白具有良好的生物活性，在提取過(guò)程中應(yīng)使提取溫度低于變性溫度。

第三，需選用適當(dāng)?shù)拿?。一般從陸生哺乳?dòng)物組 織中提取膠原蛋白時(shí)，采用胃蛋白酶在其zui適作用溫度下進(jìn)行提取是合理的，但對(duì)于魚(yú)類等水生動(dòng)物，由于其膠原蛋白的變性溫度比陸生哺乳動(dòng)物低，因此許多蛋白 酶便不適用，如果在這些酶的zui適作用溫度下提取可能會(huì)破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動(dòng)物皮及其加工 副產(chǎn)物中，應(yīng)用酶法從動(dòng)物骨中提取膠原蛋白及其多肽報(bào)道較少。

純化

可用于膠原蛋白的純化方法包括鹽析法、透析法、離心法、電泳法和色譜法，其中鹽析法、離心法和電泳法zui為常用。由于單一方法難以*分離純化膠原蛋白，實(shí)際 操作都是通過(guò)復(fù)合法來(lái)達(dá)到分離純化膠原蛋白的目的。鹽析法一般采用高濃度NaCl；離心法常選用制備型低溫超速離心機(jī)；電泳法多采用十二烷基*聚丙烯 酰胺凝膠電泳法（SDS-PAGE），該法既可用于膠原蛋白的分離純化，還可用來(lái)測(cè)定膠原蛋白分子的相對(duì)分子質(zhì)量。像有人用破碎、酶解、鹽析三步法提純蘇 尼特羊骨骼I型膠原蛋白。先去除骨頭里的非膠原物質(zhì)，然后往沉淀中10%的胃蛋白酶，在4℃的條件下消化24h，以14000r/min離心40min。 棄沉淀往上清液中加NaCL，使它終濃度達(dá)到0.9moL/L，靜止過(guò)夜，再離心，zui后的沉淀就是I型膠原蛋白。

溫州魚(yú)皮膠原蛋白肽生產(chǎn)線*酶解膠原蛋白的工藝

主要分為單酶水解法和多酶水解法。多酶水解法又分為混合酶水解法（比如牛胰蛋白酶，鏈霉菌蛋白酶，芽孢桿菌蛋白酶混合）和分步酶水解胃蛋白酶提取膠原蛋白的電泳圖譜法， 酶法提取皮膠原具體實(shí)驗(yàn)工藝及條件的選取通常應(yīng)考慮要開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品對(duì)分子量的要求，要得到分子量較小的膠原多肽一般采用多酶水解法。

影響酶解效果的因素主要 有：酶的種類、加酶量、酶解溫度、酶解時(shí)間、pH值及料水比。

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