FSRPAFL 新型髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞靶向肽E1-3

【中文名稱】新型髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞靶向肽

【英文名稱】E1-3

【分子式】C41H60N10O9
【分子量】836.98

【結(jié)構(gòu)】

【品    牌】碳水科技（Tanshtech）

【純   度】95%以上

【保    存】-20℃

【序列號(hào)】H2N-Phe-Ser-Arg-Pro-Ala-Phe-Leu-OH

FSRPAFL 新型髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞靶向肽E1-3

【產(chǎn)品特性】

E1-3 肽（序列 FSRPAFL）由澳大利亞團(tuán)隊(duì)通過噬菌體展示技術(shù)在 DAOY 髓母瘤細(xì)胞上篩選得到。

E1-3（FSRPAFL）的基本作用

選擇性識(shí)別髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞

在多輪噬菌體展示篩選中，E1-3 對(duì)髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞（DAOY）表現(xiàn)出高親和力結(jié)合；對(duì)成纖維細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等非腫瘤腦細(xì)胞結(jié)合明顯較弱。

促進(jìn)藥物 / 載體的細(xì)胞攝取

將 E1-3 與多柔比-星偶聯(lián)后，可顯著提高 DOX 在 DAOY 細(xì)胞中的內(nèi)化和殺傷效應(yīng)，同時(shí)對(duì)正常細(xì)胞毒性更低。

其它研究中，E1-3 也被證明能促進(jìn)帶有熒光標(biāo)記或核酸載荷的納米載體進(jìn)入 MB 細(xì)胞。

具有一定的“腦靶向 / 穿 BBB"潛力

在體外血腦屏障（BBB）模型中，E1-3-DOX 偶聯(lián)物可以透過內(nèi)皮層，而游離 DOX 的透過率較差；同時(shí)對(duì)非腫瘤細(xì)胞毒性下降，提示其有望在體內(nèi)實(shí)現(xiàn)“穿 BBB + 腫瘤靶向"。

多篇腦藥物遞送綜述已把 E1-3（FSRPAFL）列為具有潛力的腦部/腦腫瘤載藥肽之一。

作用機(jī)理

目前 E1-3 的具體受體尚未被鑒定，機(jī)制主要來自功能和細(xì)胞水平證據(jù)。

通過在 DAOY 細(xì)胞上做反復(fù)陽性篩選、并與非腫瘤細(xì)胞做負(fù)向篩選，得到對(duì) MB 細(xì)胞高親和力的 heptapeptide，其中之一即 FSRPAFL（E1-3）。

推測(cè)為受體介導(dǎo)的內(nèi)吞

E1-3 是中性短肽，并非典型的強(qiáng)陽離子“細(xì)胞穿透肽（CPP）"，但在 DAOY 上具有明顯優(yōu)于對(duì)照肽的結(jié)合和內(nèi)化能力,在功能化的聚合物囊泡上，配體密度增加到一定閾值時(shí)，細(xì)胞攝取顯著增強(qiáng)，繼續(xù)增加則收益遞減，符合多價(jià)受體結(jié)合觸發(fā)受體介導(dǎo)內(nèi)吞的特點(diǎn)。

在體外 BBB 模型中，E1-3-DOX 的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)增強(qiáng)，提示其可能通過：

與腦內(nèi)皮細(xì)胞某種受體結(jié)合，觸發(fā)跨內(nèi)皮轉(zhuǎn)胞作用，或改變局部膜性質(zhì)，促進(jìn)藥物透過。

應(yīng)用方向與典型實(shí)例

1. 肽–藥物偶聯(lián)物（PDC）：E1-3-Doxorubicin

DOX 通過可水解的戊二酸酯（glutarate ester）連接臂與 E1-3 偶聯(lián)，得到 E1-3-DOX。在 DAOY 細(xì)胞中，E1-3-DOX 與游離 DOX 毒性相當(dāng)甚至略優(yōu)；

在正常成纖維細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞中，E1-3-DOX 的毒性明顯低于游離 DOX。

體外 BBB 模型中具有更好的通透性，說明其有望用于系統(tǒng)給藥時(shí)跨越 BBB。

證明了“髓母瘤靶向肽 + 經(jīng)典化-療藥物"這一 PDC 策略的可行性，為減少兒童 MB 的長(zhǎng)期毒副作用提供了思路。

2. 靶向核酸遞送：E1-3 工程化外泌體（EV）+ siRNA

在外泌體產(chǎn)生細(xì)胞上表達(dá)帶有 E1-3 肽的膜蛋白，使外泌體表面展示 FSRPAFL，得到 MB-tEVs；將針對(duì)促轉(zhuǎn)移 lncRNA LOXL1-AS1 的 siRNAs 裝載入 EV；結(jié)合微泡增強(qiáng)聚焦超聲（FUS），暫時(shí)性打開小鼠 BBB，促進(jìn) EV 進(jìn)入腦內(nèi)。E1-3 修飾顯著提高 EV 被 MB 細(xì)胞內(nèi)化的效率；EV-siRNA 可有效下調(diào) LOXL1-AS1，抑制 MB 細(xì)胞的遷移與侵襲等“轉(zhuǎn)移相關(guān)表型"；體內(nèi)利用 FUS 可顯著提高 MB-tEV 在腦內(nèi)的累積，為 “肽工程化 EV + 物理方式開 BBB" 的 MB 治療方案提供了原型。

3. 納米載體表面修飾：FSRPAFL-聚合物囊泡

利用可調(diào)大小和形狀的聚合物囊泡作為載體，在其表面共價(jià)修飾不同密度的 FSRPAFL；評(píng)估其與 DAOY 細(xì)胞的結(jié)合和攝取情況。

FSRPAFL 修飾顯著提高 polymerosomes 對(duì) DAOY 的結(jié)合與內(nèi)化；

存在一個(gè)配體密度范圍：太少靶向不足，太多可能因?yàn)榭臻g位阻、血漿蛋白吸附等因素反而降低“隱身性"和實(shí)際攝取；該系統(tǒng)在動(dòng)物模型中顯示出較好的免疫“隱身"特性，被認(rèn)為有希望成為 MB 靶向納米藥物平臺(tái)。