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半纖維素（hemicellulose）含量試劑盒說明書
For Research Use Only
僅供研究用
貨號：QYS-235039
半纖維素（hemicellulose）含量試劑盒說明書半纖維素（hemicellulose）含量試劑盒說明書
微量法 50管/48樣
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
半纖維素是植物細胞壁中與纖維素緊密結(jié)合的多糖混合物，是構(gòu)成細胞初生壁的主要成分，廣泛存在于植物中，是一種新型可利用能源。
測定原理
半纖維素經(jīng)酸處理后轉(zhuǎn)化成還原糖，與 DNS 生成紅棕色物質(zhì)，在 540nm 有特征吸收峰，吸光值大反映了半纖維素含量。
需自備的儀器和用品、
天平、40 目篩，恒溫水浴鍋、烘箱、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板
試劑組成和配制
試劑一：液體 60mL×1 瓶，4℃保存。試劑二：液體 12mL×1 瓶，4℃保存。試劑三：液體 12mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 10mL×1 瓶，4℃避光保存。
樣品處理
樣品 80℃烘干至恒重，粉碎，過 40 目篩。
測定操作表
空白管 測定管
樣本（g） 0.02
試劑一（μL） 1000 1000
90℃水浴 10min，25℃，8000g 離心 10min，棄上清
蒸餾水（μL） 1000 1000
充分混勻，25℃，8000g 離心 10min，此步驟重復 3 次，取沉淀 105℃，烘干至恒重
試劑二（μL） 200 200
90℃水浴 1h，自然冷卻
試劑三（μL） 200 200
混勻，25℃，8000g 離心 10min
上清（μL） 200 200
試劑四（μL） 150 150
蒸餾水（μL） 650 650
充分混勻，90℃水浴 5min，自然冷卻，25℃，8000g 離心 10min
于 1mL 玻璃比色皿中，測定 540nm 處吸光值 A 分別記為A 空白管和 A 測定管， ?A=A 測定管-A 空白管?？瞻坠苤灰还?/p>
計算公式
1、標準條件下測定的回歸方程為 y = 0.3968x+0.0306，R2=0.9961；x 為標準品濃度（mg/mL）， y 為吸光值。
2、半纖維素含量（mg/g 干重）=（△A-0.0306）÷ 0.3968÷（W÷V 樣總）×V 反總÷V 樣 = 5.04×（△A-0.0306）÷W
W：樣品質(zhì)量，g；V 樣總：加入提取液體，0.4mL；V 反總：1mL；V 樣：0.2mL。
檢測限為 1mg/g。
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