單組分 TMB 顯色液
貨號 | 品名 | 規(guī)格 |
QYE-910 | 單組分 TMB | 100ml |
QYE-950 | 單組分 TMB | 500ml |
保存:2-8℃,請勿冷凍。
穩(wěn)定性:2-8℃條件下,大于 18 個月。敏感性:高于AB 雙液。
組成:TMB,穩(wěn)定劑。
產(chǎn)品外觀:單組分 TMB 過氧化物酶底物正常情況下淡黃色、淡藍色或者是淡綠色。底物溶液 37℃ 溫浴 15 分鐘后,在 650nm 時檢測OD 值小于 0.04。
產(chǎn)品說明:
TMB 因其靈敏度較高及無致癌性而得到廣泛應用。單組分 TMB 過氧化物酶底物與辣根過氧化物酶連接物反應時產(chǎn)生一種深藍色的產(chǎn)物,適用于定量以及定性分析的酶聯(lián)免疫分析當中。又分 可溶型和沉淀型。
可溶型 | 沉淀型 |
可溶性藍褐色產(chǎn)物 | 沉淀性藍褐色產(chǎn)物 |
適用于 ELISA及其他通過液體反應檢測HRP 的應用 | 適用于Western Blot 及其免疫沉淀化學等等 |
一步即用型溶液,無需混合,方便快捷 | |
使用方法
使用之前,以超純水反復洗滌的適當容器, 倒出適量單組分TMB 底物溶液,即可使用。
加液:加完 HRP 結(jié)合物并溫育一定時間后, 洗板 3-5 次,每孔加 TMB 底物 100- 150uL, 37°C 溫育 5-30 分鐘。
終止(備選):加等體積的 1N 的 HCl 或者 2N 的 H2SO4 來終止反應。酶標孔中反應液從藍色變?yōu)辄S色。
讀數(shù):終止反應后,30 分鐘內(nèi)在 450nm 處讀數(shù)。不加終止液,顯色更加穩(wěn)定,可以在 620-650nm處讀數(shù),
注意:
降低底物強度:如果出現(xiàn)高的反應背景和/或沉淀,表明 TMB 底物反應過于強烈。為了避免產(chǎn)生沉淀,可以在加入終止液后馬上讀數(shù);另外,可以進一步稀釋一抗和/或HRP 結(jié)合物。為了降低非特異性背景顏色,推薦進一步降低一抗和/或 HRP 結(jié)合物的濃度,盡量避免降低底物濃度。動力學檢測:TMB 單組分底物在與過氧化物酶反應時產(chǎn)生一種藍色,可以在加底物后 620-650nm 處讀數(shù), 不需終止反應。


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