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測(cè)定意義

木質(zhì)素過氧化物酶（EC1.11.1.14）是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶，屬于木質(zhì)素降解酶系，在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應(yīng)用潛力。

測(cè)定原理

木質(zhì)素過氧化物酶氧化藜蘆醇生成藜蘆醛，在310nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）。

試劑組成和配制    

試劑一：液體25mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體15mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體10mL×1瓶，4℃保存。                     

樣品處理

新鮮土樣風(fēng)干，過30-50目篩。

測(cè)定操作

酶活計(jì)算公式

a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

酶活性定義：每克土壤每天氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

S-LiP活性（nmol/d /g 土樣）= ×V反總÷W÷T= 344×△A÷W

ε：藜蘆醛摩爾消光系數(shù)：9300L/mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.4mL； W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，3h

2. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

酶活性定義：每克土壤每天氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

S-LiP活性（nmol/d /g 土樣）= ×V反總÷W÷T= 688×△A÷W

ε：藜蘆醛摩爾消光系數(shù)：9300L/mol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.4mL； W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，3h

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