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PCR反應效率低值重新調(diào)整到理想范圍步驟2023/2/20
反應效率視為實時熒光定量PCR分析設計和優(yōu)化的關鍵因素。利用標準曲線(通過對目標模板進行連續(xù)梯度稀釋獲得)獲取效率值。該效率值可作為總反應的“健康”標志。低效率與高效率所造成的影響有所不同。改善上述兩...
PCR實驗操作注意事項2023/2/10
實驗操作注意事項：盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應的原因，樣品間的交叉污染也是原因之一。因此，不僅要在進行擴增反應是謹慎認真，在樣品的收集、抽提和擴增的所有環(huán)節(jié)都應該注意：1、戴一次性手套，若...
培養(yǎng)基按用途分類詳解2023/1/29
培養(yǎng)基培養(yǎng)基是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽以及維生素和水等。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基...
PCR 反應特異性提高的五大方法2023/1/16
PCR反應特異性提高的五大方法：1.引物的設計引物最好在模板cDNA的保守區(qū)設計，長度15-30bp，GC含量小于60%，3’端不超過連續(xù)三個G或C，堿基分布錯落有致，避免引物自身形成二聚體，設計完成...
ELISA試劑盒是否檢測目的抗原方法2023/1/9
利用干擾實驗即可辨別elisa試劑盒是否檢測目的抗原，方法如下：1、將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody:antigen≈1:2的混合孵育液；2、37℃孵育15分...
冷凍細胞解凍程序2023/1/5
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單zhi定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它zhi定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，...
做ELISA實驗不能用凍存后的全血原因2022/12/19
很多ELISA實驗新手客戶都會咨詢我司技術能否把全血提取出來放-70℃條件保存，等實驗開展了（比如一個月左右的時間）再離心全血取血清或者血漿做ELISA實驗？這種做法我司技術都是持反對建議的。與此同時...
淺談逆轉錄實驗三大要素2022/12/12
逆轉錄（reversetranscription）是以RNA為模板合成DNA的過程，即RNA指導下的DNA合成，逆轉錄實驗包括3大要素，分別是引物、逆轉錄酶和RNA模板：1.引物：逆轉錄引物主要有3種...
分析對照品與標準品差異2022/11/23
對照品和標準品一樣是指國家藥品標準中用于鑒別、檢查、含量測定、雜質(zhì)和有關物質(zhì)檢查等標準物質(zhì)，它是國家藥品標準不可分割的組成部分。國家藥品標準物質(zhì)是國家藥品標準的物質(zhì)基礎，它是用來檢查藥品質(zhì)量的一種特殊...
PCR反應的主要特點2022/11/14
基因擴增技術（PCR）聚合酶鏈反應（polymerasechainreaction簡稱PCR）又稱無細胞分子克隆系統(tǒng)或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增法，是基因擴增技術的一次重大革新?？蓪O微量的...
多克隆抗體和單克隆抗體的用途盤點2022/11/11
單克隆抗體的定義:單克隆抗體是僅與目標蛋白某一特定表位結合的單一抗體。單克隆抗體的制備：簡單來說就是將免疫原注射到宿主動物體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應，之后把B細胞從脾臟中移出，單種B細胞與骨髓瘤細胞融合為B細胞...
解說細胞培養(yǎng)中血清的鑒別方法及作用2022/11/7
血清在細胞培養(yǎng)中的鑒別方法及作用，詳情解說如下：一、鑒別方法：血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。其周圍所析出之淡黃色...
凍存動物細胞四個重點過程介紹2022/10/31
一個實驗室得到一個新的細胞株后，首先要把該細胞株培養(yǎng)擴增后凍存起來。細胞凍存首先可以在由于污染等情況丟失細胞時有備份可用，另外幾乎所有細胞在培養(yǎng)傳代的過程中發(fā)生一定程度的變異，為了保持實驗結果的一致，...
分析Rt-PCR，qPCR及PCR的差異2022/10/24
PCR全稱聚合酶鏈式反應（PolymeraseChainReaction），指利用Taq和/或Pfu核酸酶驚醒的體外特異性擴增某特定核算序列Rt-PCR一般指反轉錄PCR（ReverseTranscr...
PCR反應模板核酸的提取制備方法2022/10/17
PCR反應的關鍵因素主要有引物的選擇與設計，酶的質(zhì)量。模板的制備，在前二者都穩(wěn)定可行的情況下，PCR模板的制備尤為重要。模板處理方法的選擇及操作人員的基本技能，決定分離模板核酸(DNA或RNA)的質(zhì)和...
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