【適用儀器】

適用于 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche480 等全自動(dòng)熒光PCR 檢測(cè)儀。

【檢測(cè)原理】

東部馬腦炎病毒檢測(cè)試劑盒本試劑盒根據(jù)熒光 PCR 技術(shù)原理，針對(duì) PCR試劑盒設(shè)計(jì)特異性引物和 Taqman 探針，通過(guò)熒光 PCR 檢測(cè)儀進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì) PCR試劑盒的檢測(cè)。

服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
【儲(chǔ)存條件及有效期】

1．避光-20℃儲(chǔ)存，有效期 12 個(gè)月。
2．低溫運(yùn)輸不能超過(guò) 4 天；開封后避光-20℃儲(chǔ)存，對(duì)有效期沒有影響。避免反復(fù)凍融，凍融 6 次不影響檢測(cè)效果。

3．生產(chǎn)日期、有效期至：見外包裝盒。

【樣本要求】

1．樣本種類：鼻/、痰液、支氣管肺泡灌洗液；培養(yǎng)物等樣品。
2．保存條件：采集的標(biāo)本應(yīng)及時(shí)送檢，24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)的應(yīng) 4℃保存，超過(guò) 24 小時(shí)的最好-70℃保存，并避免反復(fù)凍融。
3.步驟:②中 55℃時(shí)熒光檢測(cè)，檢測(cè)通道為 FAM。*ABI 系列熒光 PCR 儀不選 ROX 校正，淬滅基團(tuán)選 None。
4 ． 結(jié)果分析根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)起止值，（建議起始設(shè)在 3～15、終止設(shè)在 5～20，同時(shí)調(diào)整陰性對(duì)照的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線），點(diǎn)擊分析，在報(bào)告界面查看結(jié)果。

【結(jié)果判讀】

1．FAM 通道檢測(cè)。

2．陰性：Ct 值＞38 或未檢出。

3．陽(yáng)性：擴(kuò)增曲線呈 S 型，且 Ct 值≤35。

4．可疑：擴(kuò)增曲線呈 S 型，且 35＜Ct 值≤38，需復(fù)檢；復(fù)檢結(jié)果若一致，判定結(jié)果為陽(yáng)性。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
1．樣品采集、運(yùn)輸、保存不當(dāng)，試劑運(yùn)輸、保存、配置不當(dāng)都可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，甚至?xí)?dǎo)致假陰性結(jié)果。

2．如果實(shí)驗(yàn)室污染、試劑污染、樣品交叉污染，可能出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。
【質(zhì)量控制】

1．陰性對(duì)照：Ct 值＞38 或未檢出。

2．陽(yáng)性對(duì)照：擴(kuò)增曲線呈 S 型，且 Ct 值≤30。

3．同一實(shí)驗(yàn)以上要求需同時(shí)滿足，否則本次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

4．每種檢測(cè)靶標(biāo)都需設(shè)陰陽(yáng)對(duì)照，不同的靶標(biāo)根據(jù)對(duì)應(yīng)陰性調(diào)整基線閾值。

公司正在出售的產(chǎn)品：