【參數(shù)信息】
英文名稱:OregonGreen488 BAPTA;OG 488 BAPTA
中文名稱:俄勒岡綠488 BAPTA ;OG488 BAPTA鈣離子探針
激發(fā)波長:494 nm
發(fā)射波長:523 nm
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強化生物科技
【簡單概述】(俄勒岡綠488 BAPTA )
Oregon Green 488 BAPTA is a cell-permeant, fluorogenic Ca2+ indicator used in flow cytometry and fluorescence microscopy. It exhibits a 14-fold intensity increase when bound to calcium. It has an excitation peak at 494 nm and an emission peak at 523 nm.
Oregon Green 488 BAPTA 是一種細胞滲透性熒光 Ca2+ 指示劑,用于流式細胞術(shù)和熒光顯微鏡。當(dāng)與鈣結(jié)合時,它的強度增加了 14 倍。它的激發(fā)峰位于 494 nm,發(fā)射峰位于 523 nm。
具體特性如下:
光譜特性:激發(fā)波長約 494 nm,大發(fā)射波長約 523nm,與 488 nm 氬離子激光線高度匹配,適用于共聚焦顯微鏡及流式細胞術(shù)。
鈣親和性:其衍生物(如 BAPTA-1、BAPTA-6F)的鈣解離常數(shù)(Kd)范圍在 0.1–3 μM,覆蓋從高親和力(適用于靜息鈣水平)到低親和力(適用于高鈣瞬變)的檢測需求。
pH 穩(wěn)定性:由于 Oregon Green 488 的 pKa 約為 4.6–4.8,其在生理 pH 范圍內(nèi)熒光信號受氫離子影響較小,但可用于酸性細胞器(如溶酶體)的 pH 監(jiān)測。
作用機制
其作用機制基于鈣離子與 BAPTA 螯合基團的結(jié)合引起熒光團構(gòu)象變化,進而改變熒光強度:
鈣結(jié)合與熒光響應(yīng):當(dāng) Ca2? 與 BAPTA 的羧基和氨基基團結(jié)合時,分子內(nèi)電子轉(zhuǎn)移效應(yīng)導(dǎo)致 Oregon Green 488 熒光團的熒光強度顯著增強(可達 100 倍)。
細胞加載方式:
細胞滲透性 AM 酯(如 Oregon Green 488 BAPTA-1 AM):可穿透細胞膜,被細胞內(nèi)酯酶水解后釋放活性指示劑,滯留于胞質(zhì)內(nèi)。
不可滲透性鹽形式(如六鉀鹽):需通過顯微注射或電穿孔導(dǎo)入細胞,適用于特定細胞類型或避免酯酶干擾的實驗。
信號檢測與校準:熒光強度變化與鈣濃度呈正相關(guān),可通過比率法(與鈣不敏感染料聯(lián)用)或單波長法量化鈣瞬變,例如在肌肉收縮、神經(jīng)遞質(zhì)釋放等過程中監(jiān)測鈣信號。
【應(yīng)用領(lǐng)域】
(一)活細胞鈣成像:
實時監(jiān)測胞質(zhì)鈣瞬變(如神經(jīng)元電活動、胰島細胞鈣信號、免疫細胞激活),尤其適用于檢測快速、小幅度的鈣變化(如動作電位誘發(fā)的鈣瞬變)。
(二)高通量篩選與流式細胞術(shù):
用于藥物篩選(如鈣通道調(diào)節(jié)劑)、細胞凋亡或代謝研究,通過微孔板讀數(shù)儀或流式細胞儀量化鈣響應(yīng)。
(三)組織與病理模型研究:
在厚組織切片(如胰腺組織、腦切片)中追蹤鈣信號,研究疾病機制(如糖尿病、神經(jīng)退行性疾?。?。
(四)多色成像與協(xié)同標(biāo)記:
與其他熒光探針(如量子標(biāo)記、紅色熒光染料)共用,實現(xiàn)多參數(shù)檢測(如鈣與 pH 或膜電位同步成像)。
【相關(guān)試劑】
mFluor Violite 500 生物su偶聯(lián)物
ReadiLeave 可逆生物su馬來酰亞胺
ReadiUse 預(yù)活化 PerCP 馬來酰亞胺
ATTO 647 acid ATTO 647酸 823803-95-8
ATTO 647 NHS ester ATTO 647 琥珀酰亞胺酯
Live or Dead 細胞活性檢測試劑盒紅/藍雙色熒光
Cell Meter 細胞衰老活性檢測試劑盒紅色熒光
Live or Dead 細胞活性檢測試劑盒 綠色/紅色雙熒光
Live or Dead 細胞活性檢測試劑盒 綠色/紅色雙熒光
Cell Meter 通用Caspase活性熒光法檢測試劑盒 紅色熒光
Cell Meter Caspase 8活性細胞結(jié)合檢測試劑盒 紅色熒光
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本試劑僅適用于科研實驗,敬請知悉。












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