【參數(shù)信息】

英文名稱：OG488,SE

中文名稱：俄勒岡綠 488 琥珀酰亞胺酯

CAS NO：198139-51-4

分子式：C25H13F2NO9

分子量：509.37

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】

OG 488, SE (Oregon green 488 succinimidyl ester) is a green fluorescent dye that is pH insensitive in the physiological pH range (pH=6-8) and can be used to monitor the proliferation of living cells or microorganisms.

OG 488，SE（俄勒岡綠 488 琥珀酰亞胺酯）是一種綠色熒光染料，在生理 pH 值范圍 （pH=6-8） 內(nèi)對(duì) pH 值不敏感，可用于監(jiān)測(cè)活細(xì)胞或微生物的增殖。

OG488 SE的作用機(jī)制基于其NHS酯基團(tuán)與生物分子中伯胺基（-NH2）的共價(jià)結(jié)合反應(yīng)。具體過(guò)程如下：

反應(yīng)特異性：NHS酯基與蛋白質(zhì)、抗體或多肽等生物分子表面的賴氨酸殘基或N末端氨基發(fā)生酰胺化反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。

標(biāo)記過(guò)程：在弱堿性條件下，OG488 SE的NHS酯基與伯胺基團(tuán)反應(yīng)，釋放N-羥基琥珀酰亞胺副產(chǎn)物，實(shí)現(xiàn)熒光染料與目標(biāo)生物分子的共價(jià)連接。

應(yīng)用特性：標(biāo)記后的復(fù)合物保留OG488的熒光特性，適用于蛋白質(zhì)追蹤、細(xì)胞表面標(biāo)記、免疫組化及活體成像等場(chǎng)景。

例如，在膠原蛋白成像中，OG488 SE標(biāo)記的探針可特異性結(jié)合膠原纖維并實(shí)現(xiàn)高分辨率可視化。

【OG488,SE，細(xì)胞成像的步驟和工作原理是什么？】

OG488, SE（Oregon Green 488 琥珀酰亞胺酯）是一種常用的熒光染料，適用于細(xì)胞成像中的生物分子標(biāo)記。

其工作原理基于琥珀酰亞胺酯基團(tuán)與生物分子（如蛋白質(zhì)、抗體或細(xì)胞表面蛋白）的伯胺基發(fā)生共價(jià)結(jié)合，形成穩(wěn)定的酰胺鍵，從而將熒光基團(tuán)特異性地標(biāo)記到目標(biāo)分子上。

OG488 的激發(fā)波長(zhǎng)約為 496 nm，發(fā)射波長(zhǎng)約為 524 nm，其熒光特性與 FITC 相似，但具有較高的光穩(wěn)定性和更寬的 pH 適應(yīng)性。

在細(xì)胞成像中，標(biāo)記后的樣品可通過(guò)熒光顯微鏡（常用 FITC 濾光片組）、共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。

細(xì)胞成像步驟（以標(biāo)記細(xì)胞為例）：

樣品準(zhǔn)備：

將細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)密度，用 PBS 緩沖液洗滌細(xì)胞以去除培養(yǎng)基殘留。

染料工作液制備：

將 OG488 SE 溶解于無(wú)水 DMSO 中制備儲(chǔ)存液（通常濃度為 1-10 mM），使用時(shí)再稀釋至工作濃度（具體濃度需優(yōu)化，通常為 1-10 μM）于合適的緩沖液中。

標(biāo)記反應(yīng)：

向細(xì)胞樣品中加入染料工作液，輕輕混勻后于 37°C 避光孵育 30-60 分鐘（時(shí)間可根據(jù)細(xì)胞類型和標(biāo)記目標(biāo)調(diào)整）。

終止反應(yīng)與洗滌：

加入含伯胺的試劑（如 Tris-HCl 緩沖液）終止反應(yīng)，再用 PBS 洗滌細(xì)胞 2-3 次，以去除未結(jié)合的染料。

成像檢測(cè)：

將細(xì)胞重懸于緩沖液（如 HHBS 含 1 mM probenecid）中，使用熒光顯微鏡（FITC 濾光片組）或共聚焦顯微鏡觀察熒光信號(hào)。如需固定細(xì)胞，可在標(biāo)記后使用 4% 多聚甲醛處理，但需注意固定可能影響熒光強(qiáng)度。

【相關(guān)試劑】

AF555疊氮化物

AF750疊氮化物

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AF405 C5馬來(lái)酰亞胺

剛果紅 CAS 573-58-0

AF488-刀豆蛋白A(ConA)探針

ReadiCleave XFD647 AML-NHS 酯

Amplite 比色法醛類定量試劑盒 藍(lán)色

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