【參數(shù)信息】
英文名稱:SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DMSO, 電泳級) 核酸凝膠染料
溶解性:可溶于水或極性有機(jī)溶劑(如DMSO)
純度:≥95%
保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。
運(yùn)輸:冰袋運(yùn)輸。
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡單概述】
SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain是一種高靈敏度熒光核酸凝膠染料,屬于不對稱花青素類衍生物。
其定義為:
一種可用于瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠中核酸檢測的熒光染料,以10,000× DMSO濃縮液形式提供,優(yōu)先結(jié)合雙鏈DNA,具有極低背景熒光和超高檢測靈敏度。
核心特性:
超高靈敏度:
對dsDNA的檢測限低至 20 pg/條帶或 60 pg/條帶,靈敏度是溴化乙錠(EtBr)的 4倍以上。
對單鏈核酸結(jié)合力較弱,可避免復(fù)雜樣本中RNA或ssDNA的干擾。
安全性:
低于EtBr的致突變性。
光譜特性:
激發(fā)波長:490 nm(主峰),次要激發(fā)峰:290 nm、380 nm。
與DNA結(jié)合后熒光發(fā)射峰:520 nm,與常用激光掃描儀高度兼容。
電泳檢測優(yōu)勢
無需脫鹽:凝膠在稀釋染料中浸泡后可直接成像,無需洗滌。
不影響酶切:染色濃度下不抑制限制性內(nèi)切酶活性,支持膠內(nèi)克隆。
【使用方法】
(一)使用前準(zhǔn)備工作
使用前將本品取出并回溫至室溫,使DMSO解凍、溶液均一。于離心機(jī)上短暫離心確保所有溶液到管底。開始使用時(shí)可將本品分裝成多個(gè)小份后凍存,小份染料溶解較快。
(二)染色方法
1.電泳后的DNA染色(后染)
(1)在瓊脂糖或非變性聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行電泳。
(2)用TE、TAE或TBE緩沖液將SYBR Green I儲存液進(jìn)行1:10,000倍稀釋。
(3)染液要充分覆蓋凝膠,室溫輕搖孵育10-40min。
2.電泳前的DNA染色(預(yù)染)
(1)配制成SYBR Green I預(yù)制凝膠
臨灌膠前將SYBR Green I儲存液按照1:10,000倍稀釋到凝膠溶液中,預(yù)制成含有SYBR Green I染料的瓊脂糖或非變性聚丙烯酰胺凝膠。
電泳結(jié)束后即可在適合的凝膠成像儀下檢測。【預(yù)染推薦用此法】
預(yù)制的SYBR Green I凝膠的DNA檢測下限,可能略高于電泳后染色。
此外,在SYBR Green I凝膠中的DNA片段遷移率明顯比無染料凝膠中的相同片段慢。
(2)作為DNA模板預(yù)染標(biāo)記
一般而言,DNA在電泳前與染料工作液至少孵育15min。
【相關(guān)試劑】
Ferrostatin-1
RiboGreen RNA檢測試劑
Pepstatin
LDS 751 Nucleic Acid Stain
三活菌素 ,Trinactin ,7561-71-9
Alcian Blue (pH 1.0) Stain Kit
XL1-Blue Electrocompetent cell
Cationic Bovine Serum Albumin
Lucifer Yellow CH (Lithium salt)
Tetranactin,四活菌素,33956-61-5
FITC Labeled GSL I-isolectin B4 FITC
Bluo-Gal β-半乳糖苷酶顯色底物(藍(lán)色)
Dewaxing/Clearing Reagent for Histology
Magenta-Gal β-半乳糖苷酶顯色底物(紅色)
FDG (Fluorescein di(β-D-galactopyranoside))
POPO 1 Blue Fluorescent Dye (1 mM in DMSO)
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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn),敬請知悉。












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