【描述】
Alexa Fluor 488-ConA結合了AF488的熒光性能與ConA的糖結合特異性,用來研究糖生物學、免疫學及細胞生物學。
ConA的功能與結構
ConA是從刀豆中提取的凝集素,分子量為102 kDa,由四個亞基組成,每個亞基含Ca2?和Mn2?結合位點,需金屬離子存在才能發(fā)揮活性。
其主要功能包括:
糖結合特異性:選擇性結合α-甘露糖和α-葡萄糖殘基,存在于糖蛋白、糖脂中。
生物學活性:
作為T細胞有絲分裂原,激活免疫細胞并誘導細胞因子釋放。
通過線粒體途徑誘導細胞凋亡和自噬。
【Alexa Fluor 488-ConA的合成與制備】
偶聯方法:
NHS酯法:利用AF488的NHS活性基團與ConA的氨基(如賴氨酸殘基)反應,形成穩(wěn)定共價鍵。
EDC/NHS交聯法:適用于羧基與氨基的偶聯,常用于大分子標記。
純化與保存:
通過親和層析去除未結合的熒光素,確保標記純度≥95%。
儲存液建議濃度為2 mg/mL,分裝后-20℃避光保存,避免反復凍融。
質量控制:
需驗證結合效率(如SDS-PAGE)及熒光性能(如光譜掃描)。
【技術參數】
英文名稱:Alexa Fluor 488-ConA
中文名稱:Alexa Fluor 488標記的刀豆凝集素A
糖類特異性:α-甘露糖;α-葡萄糖
外觀:固體
Ex/Em:495/519nm
熒光顏色:綠色
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
運輸方式:冰袋運輸
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