產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Plant Tissue Direct PCR Kit (With Dye) | HRF0241 | 100 T | 800.00 |
Plant Tissue Direct PCR Kit (With Dye) | HRF0252 | 200 T | 1300.00 |
產(chǎn)品描述
植物組織直接PCR試劑盒是一款可直接對(duì)不同類(lèi)型植物葉片進(jìn)行PCR擴(kuò)增的試劑盒,適應(yīng)性廣、穩(wěn)定性強(qiáng)。試劑盒采用的裂解緩沖液體系,可以快速的裂解多種植物樣品并釋放出基因組DNA,不需要除去蛋白、RNA或次生代謝產(chǎn)物等,即可將釋放出的基因組DNA作為模板直接用于PCR反應(yīng)。此外,樣品使用量少,低至1 mm植物葉片即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
本試劑盒中提供的2× Plant Master Mix具有很強(qiáng)的擴(kuò)增兼容性,能直接以待測(cè)樣品裂解液為模板,進(jìn)行高效特異性擴(kuò)增。該試劑為2倍濃縮PCR反應(yīng)混合液,包含了用于PCR擴(kuò)增除模板和引物外的所有組分,大大簡(jiǎn)化操作過(guò)程,降低污染幾率。
該試劑盒可用于轉(zhuǎn)基因植株鑒定、植物基因分型等。
植物組織直接PCR試劑盒產(chǎn)品組分
類(lèi)別 | 編號(hào) | 組分 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | |
HRF0241(100 T) | HRF0242(200 T) | ||||
Part I | HRF024-A | Buffer P1 | 1.25 mL × 2 | 5 mL × 2 | 4℃ |
HRF024-B | Buffer P2 | 500 μL | 1 mL × 2 | 4℃ | |
Part II | HRF024-C | 2× Plant Master Mixa | 500 μL | 1 mL × 2 | -20℃ |
a)2× Plant Master Mix:包含熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等,同時(shí)包含電泳Loading Buffer, PCR完成之后可直接電泳。
運(yùn)輸方法
冰袋運(yùn)輸。
保存方法
1. 試劑HRF024-A【Buffer P1】,置于4℃保存。有效期1年。
2. 試劑HRF024-B【Buffer P2】,中和裂解產(chǎn)物,利于更長(zhǎng)時(shí)間保存樣本,置于4℃保存。有效期1年。
3. 試劑HRF024-C【2 × Plant Master Mix】,-20℃保存,避免反復(fù)凍融。有效期1年。
操作方法
植物葉片——研磨裂解法:
①研磨儀破碎:將直徑5 mm左右的葉片置于50 μL Buffer P1中,用研磨儀加鋼珠(鋼珠直徑3mm左右,共2個(gè))破碎葉片(45 Hz,1 min),葉片破碎后溶液呈現(xiàn)綠色,瞬時(shí)離心,上清液請(qǐng)放在4℃?zhèn)溆?,? μL用于PCR擴(kuò)增。
②槍頭搗碎:推薦使用幼嫩葉片。將直徑5 mm左右的葉片置于50 μL Buffer P1中,用槍頭將葉片搗碎,搗碎后溶液呈現(xiàn)綠色,瞬時(shí)離心,上清液請(qǐng)放在4℃?zhèn)溆?,? μL用于PCR擴(kuò)增。
加熱裂解法:推薦使用幼嫩葉片。將直徑5 mm左右的葉片置于50 μL Buffer P1中,95℃加熱5-10 min(確保裂解液浸沒(méi)葉片),較難裂解的葉片(老葉片)可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間(10-20 min),加熱裂解后溶液呈現(xiàn)綠色,震蕩混勻,瞬時(shí)離心,上清液請(qǐng)放在4℃?zhèn)溆茫? μL用于PCR擴(kuò)增。
直接法:推薦使用幼嫩葉片。使用打孔器或者刀,將直徑1 mm左右的葉片直接加入到PCR反應(yīng)體系中;復(fù)雜樣本或者是長(zhǎng)片段的擴(kuò)增,推薦使用直徑<1 mm的葉片。
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