產(chǎn)品描述

植物組織直接PCR試劑盒是一款可直接對(duì)不同類型植物葉片進(jìn)行PCR擴(kuò)增的試劑盒，適應(yīng)性廣、穩(wěn)定性強(qiáng)。試劑盒采用的裂解緩沖液體系，可以快速的裂解多種植物樣品并釋放出基因組DNA，不需要除去蛋白、RNA或次生代謝產(chǎn)物等，即可將釋放出的基因組DNA作為模板直接用于PCR反應(yīng)。此外，樣品使用量少，低至1 mm植物葉片即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

本試劑盒中提供的2× Plant Master Mix具有很強(qiáng)的擴(kuò)增兼容性，能直接以待測(cè)樣品裂解液為模板，進(jìn)行高效特異性擴(kuò)增。該試劑為2倍濃縮PCR反應(yīng)混合液，包含了用于PCR擴(kuò)增除模板和引物外的所有組分，大大簡(jiǎn)化操作過程，降低污染幾率。

該試劑盒可用于轉(zhuǎn)基因植株鑒定、植物基因分型等。

植物組織直接PCR試劑盒產(chǎn)品組分

a）2× Plant Master Mix：包含熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl₂、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等，同時(shí)包含電泳Loading Buffer, PCR完成之后可直接電泳。

運(yùn)輸方法

冰袋運(yùn)輸。

保存方法

1. 試劑HRF024-A【Buffer P1】，置于4℃保存。有效期1年。

2. 試劑HRF024-B【Buffer P2】，中和裂解產(chǎn)物，利于更長(zhǎng)時(shí)間保存樣本，置于4℃保存。有效期1年。

3. 試劑HRF024-C【2 × Plant Master Mix】，-20℃保存，避免反復(fù)凍融。有效期1年。

操作方法

植物葉片——研磨裂解法：

①研磨儀破碎：將直徑5 mm左右的葉片置于50 μL Buffer P1中，用研磨儀加鋼珠（鋼珠直徑3mm左右，共2個(gè)）破碎葉片（45 Hz，1 min），葉片破碎后溶液呈現(xiàn)綠色，瞬時(shí)離心，上清液請(qǐng)放在4℃?zhèn)溆?，? μL用于PCR擴(kuò)增。

②槍頭搗碎：推薦使用幼嫩葉片。將直徑5 mm左右的葉片置于50 μL Buffer P1中，用槍頭將葉片搗碎，搗碎后溶液呈現(xiàn)綠色，瞬時(shí)離心，上清液請(qǐng)放在4℃?zhèn)溆?，? μL用于PCR擴(kuò)增。

加熱裂解法：推薦使用幼嫩葉片。將直徑5 mm左右的葉片置于50 μL Buffer P1中，95℃加熱5-10 min（確保裂解液浸沒葉片），較難裂解的葉片（老葉片）可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間（10-20 min），加熱裂解后溶液呈現(xiàn)綠色，震蕩混勻，瞬時(shí)離心，上清液請(qǐng)放在4℃?zhèn)溆茫? μL用于PCR擴(kuò)增。

直接法：推薦使用幼嫩葉片。使用打孔器或者刀，將直徑1 mm左右的葉片直接加入到PCR反應(yīng)體系中；復(fù)雜樣本或者是長(zhǎng)片段的擴(kuò)增，推薦使用直徑<1 mm的葉片。

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