用于培養(yǎng)細(xì)胞的 Thermo Scientific 亞細(xì)胞蛋白分離試劑盒可從 5 個(gè)不同的細(xì)胞區(qū)室中分離和富集蛋白。

用于培養(yǎng)細(xì)胞的亞細(xì)胞蛋白分離試劑盒的特點(diǎn)：

?簡明 — 在不到 3 小時(shí)內(nèi)從哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞中提取功能性細(xì)胞質(zhì)、膜、可溶性核、染色質(zhì)結(jié)合和細(xì)胞骨架蛋白組分
? 便利 — 無需使用梯度超速離心即可執(zhí)行簡單程序
? 全套 — 使用單一試劑盒獲得細(xì)胞質(zhì)、膜、可溶性核、染色質(zhì)結(jié)合和細(xì)胞骨架蛋白組分
? 培養(yǎng)細(xì)胞 — 經(jīng)開發(fā)和優(yōu)化，配合培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞使用；對(duì)于組織樣品，使用用于組織的亞細(xì)胞分離試劑盒
? 兼容 — 將提取物用于下游應(yīng)用，如蛋白檢測(cè)、Western 印跡、蛋白檢測(cè)、電泳遷移率變動(dòng)實(shí)驗(yàn)、報(bào)告基因和酶活性檢測(cè)。

亞細(xì)胞組分的應(yīng)用：
? 從不同細(xì)胞區(qū)室中提取和富集蛋白
? 從相同細(xì)胞中分離細(xì)胞質(zhì)、核、膜和細(xì)胞骨架蛋白
? 分析細(xì)胞質(zhì)、核、膜和細(xì)胞骨架中的蛋白
? 研究蛋白轉(zhuǎn)位

亞細(xì)胞蛋白分離使得可從特定細(xì)胞區(qū)室進(jìn)行蛋白定位評(píng)估和蛋白富集。Thermo Scientific 亞細(xì)胞蛋白分離試劑盒含有各種試劑，可按步驟在不到 3 小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞裂解為功能性細(xì)胞質(zhì)、膜、可溶性核、染色質(zhì)結(jié)合和細(xì)胞骨架蛋白組分。從每個(gè)亞細(xì)胞區(qū)室獲得的提取物通常在各組分間有低于 15% 的污染，該純度對(duì)于大多數(shù)研究蛋白定位和再分布的實(shí)驗(yàn)而言已足夠。

用于培養(yǎng)細(xì)胞的亞細(xì)胞蛋白分離試劑盒含有 4 種提取緩沖液、一種穩(wěn)定的核酸酶和 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制劑混合物。每個(gè)試劑盒有足以分離 50 個(gè) 20 µL 細(xì)胞團(tuán)塊（相當(dāng)于約 2 g 的細(xì)胞團(tuán)）的試劑。（對(duì)于組織樣品，使用我們的用于組織的亞細(xì)胞蛋白分離試劑盒。）

添加至細(xì)胞團(tuán)塊中的種試劑盒試劑會(huì)導(dǎo)致選擇性膜透化，釋放可溶性細(xì)胞質(zhì)內(nèi)容物。第二種試劑可溶解血漿、線粒體和 ER-高爾基體膜，但不能溶解核膜。在通過離心回收完整的細(xì)胞核后，第三種試劑產(chǎn)出可溶的細(xì)胞核抽提物。使用微球菌核酸酶進(jìn)行一次額外的細(xì)胞核抽提，以釋放染色質(zhì)連結(jié)細(xì)胞核蛋白。然后使用種試劑提取回收的不溶性團(tuán)塊以分離細(xì)胞骨架蛋白。

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