Thermo Scientific Pierce 交聯(lián) IP 試劑盒采用傳統(tǒng) IP 方法，以包括將 IP 抗體交聯(lián)至蛋白 A/G 瓊脂糖的試劑和方案，從而在不產(chǎn)生抗體污染的情況下實現(xiàn)抗原免疫沉淀。

這些特點帶來的主要益處是能夠純化靶蛋白而不被抗體污染，并且能夠更有效地洗滌樣品并從微珠狀瓊脂糖樹脂中分離樣品。

交聯(lián) IP 試劑盒的特點：

•消除抗體污染—將抗體不可逆地連接至瓊脂糖微珠，從而盡可能減少重鏈和輕鏈與純化蛋白共洗脫
•簡單高效的可擴展性—僅使用單一 IP 實驗所需的抗體量或固定 100-200 μg 抗體即可制備現(xiàn)成 IP 親和樹脂用于許多實驗
•測定可靠性和樣品的處理—Pierce 離心柱可消除樹脂損耗，且溶液分離效率高于僅使用微量離心管的傳統(tǒng) IP 方法
•制備的抗體親和樹脂可重復使用—抗體以共價方式固定化，且通常不會被溫和洗脫程序滅活，因此樹脂通?？芍貜褪褂脭?shù)次
•全套試劑盒—包裝中包括足以進行至少 50 次抗體固定和 IP 實驗的試劑和離心柱

應(yīng)用：
•隨后通過電泳和蛋白切除進行質(zhì)譜或測序鑒定分析的免疫沉淀
•對分子量與重鏈或輕鏈抗體片段相似的靶蛋白進行的免疫沉淀和 SDS-PAGE 分析
•對通過非變性方法（即，不涉及 SDS-PAGE 的方法）進行后續(xù)分析的靶蛋白進行的免疫沉淀

Pierce 交聯(lián) IP 試劑盒方法涉及將 IP 抗體捕獲至蛋白 A/G 瓊脂糖樹脂并通過與辛二酸二琥珀酰亞胺酯 (DSS) 交聯(lián)將其共價固定至支持物上。然后將抗體樹脂與含有目標蛋白抗原的樣品一起孵育，使抗體:抗原復合物可形成。進行洗滌以去除樣品中的非結(jié)合（可能不需要）組分后，通過使用試劑盒中提供的洗脫緩沖液從抗體中解離來回收抗原。在微量離心杯中完成整個程序，使得短暫離心后溶液與瓊脂糖樹脂分離。只有通過該程序?qū)乖M行洗脫，才能在不受抗體片段干擾的情況下識別和進一步分析抗原。此外，抗體樹脂通?？梢灾貜褪褂?，用于其他輪次的免疫沉淀。

相關(guān)產(chǎn)品
Pierce™ 交聯(lián)磁珠法 IP/Co-IP 試劑盒