【預(yù)期用途】

登革熱病毒ELISA診斷試劑盒是一種用來檢測是否感染登革熱病毒的 ELISA 檢測系統(tǒng)，它可以檢測出血清中是否存在抗登革熱病毒源性重組抗原（DENVRA）的 IgM 抗 體。

【檢測原理】

登革熱病毒ELISA試劑盒是由一種酶聯(lián)擴大的兩步法免疫檢測系統(tǒng)。在此實驗中，將登革熱陰性質(zhì)控、陽性質(zhì)控和未知濃度的血清樣品用樣品稀釋液稀釋，然后加入到包被 了抗人 IgM 抗體的微孔中溫育，之后分別加入登革熱源性重組抗原 DENVRA 和正常細胞抗原（NCA）進行溫育。溫育并洗板后，用 HRP 標(biāo)記的 DEN 特異 性抗體處理。第二次溫育并洗板后，加入 TMB 底物液進行溫育。之后再加入酸性終止液，450nm 處測 OD值可確定底物反應(yīng)的程度。當(dāng)高于一定數(shù)值時（臨界 值），樣品的吸光度值可確定樣品中是否存在登革熱抗體。

注意：陰性質(zhì)控和弱陽性質(zhì)控以內(nèi)在質(zhì)控形式提供，其目的是為了檢測試劑盒成分的完整性。

登革熱 IgM ELISA 試劑盒提供了足夠做 96 個測試所需要的試劑。試劑盒成分如下：

登革熱檢測特定材料：

1）抗人 IgM 包被的包被板：帶板蓋的板架，包被有抗人 IgM， 96 孔，2-8℃下儲存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。

2）樣品稀釋液：1 瓶，25ml，即用，含吐溫 20 的 Tris-HCl 緩沖液，0.05%的 Proclin 防腐劑和添加劑，用于試驗樣品，陽性和陰性質(zhì)控的稀釋，2-8℃下儲存，有效期內(nèi)穩(wěn)定

3）即用型的登革熱重組性抗原（DENRA）：1 瓶，3ml，含吐溫 20 的 Tris-HCl 緩沖液，＜0.05%的 Proclin防腐劑，抗生素（0.0025-0.004% G418 硫酸鹽），登革熱重組抗原和添加劑， 2-8℃下儲存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。

登革熱 IgM 抗體檢測試劑盒(捕獲法)說明書

4）即用型正常細胞抗原（NCA）：1 支，3ml，含吐溫 20 的 Tris-HCl 緩沖液，＜0.05%的 Proclin 防腐劑，COS-1 細胞的上清， 2-8℃下儲存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。

5）登革熱陰性質(zhì)控：1 支，50ul 陰性血清，登革熱陰性質(zhì)控可輔助監(jiān)測試劑盒的完整性。2-8℃下儲存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。

6）登革熱 IgM 陽性質(zhì)控：1 支，50ul 含 0.03%的 proclin 的陽性血清，登革熱陽性質(zhì)控可輔助監(jiān)測試劑盒的完整性。2-8℃下儲存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。

7）10 倍濃縮洗滌液：1 瓶，120ml，含吐溫 20 的 10 倍濃縮的磷酸緩沖鹽，2-8℃下儲存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。

8）HRP 標(biāo)記的即用型酶聯(lián)物，1 瓶，6ml，HRP 標(biāo)記的黃熱病毒活性單克隆抗體，含吐溫 20 的 Tris-HCl 緩沖液，＜0.01%的硫柳汞防腐劑和添加劑，2-8℃下儲存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。9）Enwash：1 瓶，20ml，即用，含吐溫 20 的磷酸緩沖鹽， 2-8℃下儲存，有效期內(nèi)穩(wěn)定10） TMB 底物液：1 瓶，9ml 液態(tài)底物液，即用，2-8℃下儲存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。注意：底物液必須始終儲存于避光試劑瓶中。11） 終止液：1 瓶，內(nèi)含 6ml 即用型的終止液，1N 的硫酸，2-8℃下儲存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。注意：強酸，請佩戴手套、口罩和安全鏡，按照安全條例處理所有的材料。