利什曼原蟲黑熱IgG抗體檢測試劑盒說明書

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【檢測原理】

利什曼原蟲IgG/IgM抗體酶聯(lián)免疫診斷試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知 LSM-Ab 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將 LSM-Ab 和生物標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物 A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中 LSM-Ab 的濃度呈比例關(guān)系。

【自備材料】

蒸餾水。

加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

振蕩器及磁力攪拌器等。

【安全性】

避免直接接觸終止液和底物 A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

【操作步驟】

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入好后的標(biāo)準(zhǔn)品 50ul 于反應(yīng)孔、加入待測樣品 50ul 于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入 50ul 的生物標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 1 小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩 30 秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作 3 次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入 80ul 的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 30 分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩 30 秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作 3 次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物 A、B 各 50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 10 分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入 50ul 終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

【寄生蟲檢測試劑盒】

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