齊一生物科技（上海）有限公司
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For Research Use Only
僅供研究用
貨號(hào)：QYS-234087
山梨醇含量試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)
定測(cè)定意義：
山梨醇廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，不僅是糖運(yùn)輸形式之一，而且與生
物抗逆性和食物風(fēng)味密切相關(guān)。因此，在糖代謝、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測(cè)山梨
醇含量變化。
山梨醇含量試劑盒說明書測(cè)定原理：
山梨醇在堿性溶液中與銅離子形成藍(lán)色絡(luò)合物，在 655nm 波長有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
試劑一：液體 10mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 10mL×1 瓶 ，4℃保存。
山梨醇含量試劑盒說明書山梨醇的提?。?br />按照組織質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.2g 組織，加入
2mL 蒸餾水），研磨成勻漿， 95℃水浴 10 分鐘（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后，
8000g，25℃離心 10min，取上清液待測(cè)。
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 655nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表（在 EP 管中依次加入下列試劑）：
試劑（μL） 空白管 測(cè)定管
試劑一 150 150
試劑二 140 140
樣本 1000
蒸餾水 1000
混勻后室溫靜置 15min，8000g，25℃離心 10min，取上清液測(cè) 655nm 下吸光值 A，計(jì)算 ΔA=A
測(cè)定管-A 空白管?？瞻坠苤灰鲆还堋?br />山梨醇含量計(jì)算：
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為 y = 0.352x - 0.002；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y 為吸光
值。
2、按照樣本質(zhì)量計(jì)算山梨醇含量（mg /g 鮮重）＝[(ΔA＋0.002)
÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA＋0.002) ÷W
3、按照樣本蛋白濃度計(jì)算
山梨醇含量（mg /mg prot）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA＋0.002) ÷Cpr V1：
加入樣本體積，1mL；V2：加入提取液體積，2 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；
W：樣本質(zhì)量，g
注意：zui低檢測(cè)限為 1μg/g 鮮重或 0.01μg /mg prot
