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木質(zhì)素（Lignin）含量試劑盒資料詳細(xì)分光光度法 50 管/48 樣
注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
木質(zhì)素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇構(gòu)成的一類(lèi)物質(zhì)，存在于木質(zhì)組織
中，主要作用是通過(guò)形成交織網(wǎng)來(lái)硬化細(xì)胞壁。木質(zhì)素主要位于纖維素纖維之間，起抗壓作
用。
測(cè)定原理
木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙酰化后在 280nm 處有特征吸收峰，280nm 的吸光值高低與木質(zhì)素
含量正相關(guān)。
木質(zhì)素（Lignin）含量試劑盒資料詳細(xì)需自備的儀器和用品
天平、40目篩，玻璃試管、燒杯、離心機(jī)，恒溫水浴鍋、烘箱、封口膜、紫外分光光度計(jì)、
1mL石英比色皿、高氯酸，濃硫酸。
試劑組成和配制
試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 100mL×1瓶，4℃保存。
樣品處理
樣品 80℃烘干至恒重，粉碎，過(guò)40 目篩，稱(chēng)取約5mg（記為W）于10mL玻璃試管中（務(wù)
*玻璃試管，不可用Ep管）
測(cè)定操作表
計(jì)算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y =1.0124x+0.2205，R2
=0.9889
Lignin（mg/g干重）= (ΔA-0.2205)÷1.0124×V 反總×10-3
÷W×T=0.002×(ΔA-0.2205) ÷W×T
V 反總：反應(yīng)總體積：2.04mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：稀釋倍數(shù)
注意事項(xiàng)
1. 試劑一有毒性，請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施，加熱前必須用封口膜密封，以防氣體溢出。
2. 加熱過(guò)程中有劇烈反應(yīng)，震蕩時(shí)輕搖，以免壓力過(guò)大噴出造成人生傷害。
3. 試劑三具有強(qiáng)刺激性，建議操作過(guò)程全部在通風(fēng)櫥子操作。
4. 取上清加試劑三步驟根據(jù)自己樣品乙酰化程度，試劑三的用量可調(diào)整，保證吸光值在
空白管 測(cè)定管
樣本（mg） 5
試劑一（μL） 1000 1000
高氯酸（μL） 40 40
于 10mL玻璃試管中，用封口膜密封，充分混勻，80℃水浴40min，每隔10min 震
蕩一次，然后自然冷卻
試劑二（μL） 1000 1000
充分混勻
上清（μL） 10 10
試劑三（μL） 1990（參照注意事項(xiàng)四） 1990（參照注意事項(xiàng)四）
取1mL于石英比色皿，測(cè)定280nm處吸光值A(chǔ)。分別記為A 空白管和A 測(cè)定管，
ΔA=A測(cè)定管-A 空白管 0.1-0.8之間即可，并在公式中參與計(jì)算。
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