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研究人員顯著提高了活細胞結(jié)構(gòu)照明顯微術(shù)(SIM)的分辨率

2015-8-28  閱讀(389)

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研究人員顯著提高了活細胞結(jié)構(gòu)照明顯微術(shù)(SIM)的分辨率,SIM是與其它超分辨技術(shù)相比有許多好處的一類顯微術(shù)。其結(jié)果已經(jīng)給人們就細胞過程提供了一個更為詳細的了解,且對健康研究具有重要的意義。目前,許多其它類型的超分辨顯微鏡都有缺陷;例如定位顯微術(shù)和受激發(fā)射損耗顯微術(shù)必須使用高強度的光照和熒光標記才能獲取圖像,而這會對活體細胞造成損害,即使是在短時間之后。SIM所用的照明強度水平要低得多,但到目前為止,它的分辨率一直限于衍射上限的兩倍。為了提高SIM的分辨率,Dong Li 等人用了一種較高數(shù)值孔徑(NA)的透鏡。較高的NA不僅將SIM的分辨率從100納米提高至84納米,而且將激發(fā)限制在細胞容量的一小部分,從而進一步降低了光毒性并消除了失焦的背景。在第二種方法中,該小組用處于某種波長的照明條紋來激活一個熒光蛋白亞組,并接著用處于第二種波長的條紋模式來誘導這些蛋白發(fā)射熒光。這兩種照明模式的結(jié)合可給出62納米的分辨率,這一分辨率比僅用一種模式所得到的分辨率要好得多。研究人員接著用這些改善的分辨技術(shù)來獲取對細胞過程的新的了解。例如,研究界就肌動蛋白在網(wǎng)格蛋白介導的細胞內(nèi)吞中所起的作用存在著某些爭論,但通過SIM分辨率的改善,Li等人能夠確認,肌動蛋白的存在增加了網(wǎng)格蛋白內(nèi)化的概率。他們的研究還用這些新的分辨度對其它數(shù)種細胞過程進行了探索,并為蛋白互動提供了漂亮的圖像和的細節(jié)。

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