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果膠甲酯酶比色法試劑盒主要用途
植物果膠甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過果膠甲酯酶和酒精氧化酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中產(chǎn)生的甲醛，與N-甲基苯噻唑啉酮-2-腙反應(yīng)，酸性氧化后，產(chǎn)生藍(lán)色甲簪產(chǎn)物，采用比色法測(cè)定其峰值的變化，以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種植物組織裂解懸液樣品的果膠甲酯酶活性及其抑制劑的檢測(cè)。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。
果膠甲酯酶比色法試劑盒檢測(cè)原理
果膠甲酯酶（pectin methylesterase；PME；EC3.1.1.11），又稱為果膠酯酶（pectinesterase），是一種細(xì)胞壁相關(guān)的果膠水解（pectolytic）酶蛋白，分子量為34－37kDa，存在于所有植物組織中，以及植物病源菌（真菌和細(xì)菌）里。果膠（pectin）是細(xì)胞壁的主要結(jié)構(gòu)元素，占35％的多糖。果膠是同型聚糖半乳糖醛酸（homogalacturonan；HGA）和鼠李聚糖半乳糖醛酸（rhmnogalacturonan；RG）的復(fù)合物。其中80％的同型聚糖半乳糖醛酸為甲基酯化。果膠甲酯酶通過使果膠去酯化（deesterification），產(chǎn)生水溶性的果膠酸（pectic acid）和甲醇。植物果膠甲酯酶分成2型：I型和II型。其功能在于參與植物發(fā)育、形態(tài)形成、成熟、細(xì)胞壁延展和穩(wěn)固、水果軟化脫落和衰老、防止感染等，以及細(xì)菌和真菌果膠降解等。果膠甲酯酶常用于果菜汁等的澄清、液化、和水果軟化和成熟。基于底物果膠，在果膠甲酯酶的催化下，產(chǎn)生果膠酸和甲醇，進(jìn)而在酒精氧化酶（alcohol oxidase）的作用下，產(chǎn)生并收集甲醛（aldehyde），同時(shí)使用N-甲基苯噻唑啉酮-2-腙（N-methylbenzothiazolinone-2-hydrazone；MBTH），在中性條件下，進(jìn)行濃縮反應(yīng)，酸化處理，在三價(jià)鐵氧化劑的參與下，形成藍(lán)色甲簪產(chǎn)物，在分光光度儀下（620nm波長(zhǎng)），來定量分析果膠甲酯酶的總活性。果膠甲酯酶酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)為：
pectin methylesterase
Pectin-COOCH3 + 2H2O → Pectin-COO－ + H3O－ + CH3OH
alcohol oxidase
CH3OH + O2 → H2C=O + H2O2
H2C=O + MBTH + Fe3+ → blue formazan dye
齊一生物科技提供動(dòng)植物含量、酶活測(cè)定試劑盒及高效液相色譜法及氣象色譜法代測(cè)服務(wù)
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