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氨基酸是含有氨基和羧基的一類有機(jī)化合物的通稱。生物功能大分子蛋白質(zhì)的基本組成單位，是構(gòu)成動(dòng)物營養(yǎng)所需蛋白質(zhì)的基本物質(zhì)。是含有堿性氨基和酸性羧基的有機(jī)化合物。氨基連在α-碳上的為α-氨基酸。組成蛋白質(zhì)的氨基酸均為α-氨基酸。
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量高效液相色譜法測(cè)定原理：
大多數(shù)蛋氨酸（甲硫氨酸）本身不能發(fā)射熒光，又不具有紫外吸收的特性，需要制成某初中形式的衍生物后才能檢測(cè)。本說明書中運(yùn)用蛋氨酸（甲硫氨酸）與 PITC 柱前衍生，紫外檢測(cè)器 254nm 波長下檢測(cè) 。
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量高效液相色譜法 試劑的組成和配制：
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量高效液相色譜法實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作：
蛋氨酸（甲硫氨酸）的提?。?br />（1）游離蛋氨酸（甲硫氨酸）的提取：
（2）結(jié)合態(tài)蛋氨酸（甲硫氨酸）提?。?br />蛋氨酸（甲硫氨酸）的衍生：
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量測(cè)定操作步驟：
1、 開啟電腦、檢測(cè)器和泵，安裝上色譜柱，打開軟件，在方法組中設(shè)置進(jìn)樣量，設(shè)置完畢保存方法組。
2、 用流動(dòng)相過柱子，待基線穩(wěn)定后開始加樣。
3、 加入標(biāo)準(zhǔn)品，分離蛋氨酸（甲硫氨酸），（柱子不同，保留時(shí)間有差異）。
4、 加入樣品 ，在相應(yīng)保留時(shí)間處檢測(cè)蛋氨酸（甲硫氨酸）的峰面積。
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量高效液相色譜法含量的計(jì)算：
樣本溶液中各種蛋氨酸（甲硫氨酸）濃度(ug/mL)=f1/f2*C F1=樣本溶液中個(gè)蛋氨酸（甲硫氨酸）峰面積/內(nèi)標(biāo)峰面積
F2=混合蛋氨酸（甲硫氨酸）標(biāo)準(zhǔn)品溶液中各蛋氨酸（甲硫氨酸）峰面積/內(nèi)標(biāo)峰面積 C=混合蛋氨酸（甲硫氨酸）標(biāo)準(zhǔn)品中個(gè)蛋氨酸（甲硫氨酸）濃度
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量高效液相色譜法注意事項(xiàng)：
1、 為了避免使用過程中柱壓變化過大，流速由小到大調(diào)節(jié)。
2、 使用完畢后，需用純乙腈沖洗柱子 30min，防止無機(jī)鹽結(jié)晶堵塞色譜柱。
3、 在儀器操作過程中，要時(shí)刻注意柱壓的變化，防止柱壓過高，損害儀器。
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