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測定意義：

植酸又稱肌酸、環(huán)己六醇六全-二氫磷酸鹽，它主要存在于植物的種子、根干和莖中，其中以豆科植物的種子、谷物的麩皮和胚芽中含量最高。植酸作為螯合劑、抗氧化劑、保鮮劑、水的軟化劑、發(fā)酵促進劑、金屬防腐蝕劑等，廣泛應用于食品、醫(yī)藥、油漆涂料、日用化工、金屬加工、紡織工業(yè)、塑料工業(yè)及高分子工業(yè)等行業(yè)領域。

測定原理：

磺基水楊酸-氯化鐵溶液顯紫紅色，在500nm下有最大吸光值。在pH6.0-6.5的環(huán)境下，植酸和鐵離子結合使溶液顏色變淡，測定吸光度的降低來檢測植酸含量。

所需的儀器和用品：

酶標儀、烘箱、水浴鍋、可調式移液器、96孔板、金屬震蕩儀、蒸餾水

試劑的組成和配制：

試劑一：100ml×1瓶，4℃保存；

試劑二：50mL×1瓶，4℃保存；

試劑三：100mL×1瓶，4℃保存；

試劑四：6mL×1瓶，4℃保存。

植酸提取：

樣本烘干，粉碎過篩，稱取0.05g，加入1mL試劑一，震蕩提取2h；8000g，25℃離心10min，取上清0.5mL，加入0.5mL試劑二，混勻后4℃靜置2h，離心取上清待測。

測定步驟

1、酶標儀預熱30min以上，調節(jié)波長至500nm。

2、測定管：取100μL上清，加入900μL試劑三，混勻后取150μL加入96孔板，再加入50μL試劑四，充分混勻后500nm下測定吸光值A1。

3、空白管：取100μL蒸餾水，加入900μL試劑三，混勻后取150μL加入96孔板，再加入50μL試劑四，充分混勻后500nm下測定吸光值A2。計算ΔA=A2-A1。

空白管只要做一管。

植酸含量計算：

標準狀態(tài)下的回歸曲線為：y = 2.0284x + 0.0096，R2 = 0.993；X為植酸鈉標準品濃度（mg/mL），y為吸光值ΔA(A2-A1)。

植酸含量(mg/g干重)=（ΔA-0.0096）÷ 2.0284×V反總÷V樣÷(W÷V樣總)

                        =9.86×（ΔA-0.0096）÷W

V反總：測定液總體積，1mL；V樣：加入反應體系中樣本體積，0.1mL； V樣總：加入提取液總體積，2mL；W：樣本干重，g。

注意事項：

若ΔA高于0.2，說明樣本植酸濃度過高，需要加蒸餾水適當稀釋，并在計算結果中乘以相應的稀釋倍數

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