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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>靈敏度更高的定點(diǎn)突變?cè)噭┖?/a>
定點(diǎn)突變?cè)噭┖?/a>可以在克隆于質(zhì)粒DNA序列的特定位點(diǎn)誘導(dǎo)突變。理論上可以保證突變率達(dá)到100%。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程簡(jiǎn)單快捷只需要兩個(gè)步驟。試劑盒不需要用到M13載體和甲基化步驟。該試劑盒可以誘導(dǎo)某個(gè)已知基因的特定堿基進(jìn)行定點(diǎn)突變、再突變成野生型、密碼子突變、插入或者缺失等,因此可以用于功能基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的研究。另外由于試劑盒能夠誘導(dǎo)特異基因突變,又可以應(yīng)用于蛋白質(zhì)工程學(xué)研究領(lǐng)域。定點(diǎn)突變?cè)噭┖胁僮魇趾?jiǎn)單(根據(jù)我們提供的引物設(shè)計(jì)原則設(shè)計(jì)引物;用Muta-direct™酶進(jìn)行15~18個(gè)循環(huán)的PCR擴(kuò)增反應(yīng);Mutazyme™酶處理選擇突變克?。晦D(zhuǎn)化)。理論上在LB平板上的克隆100%是突變克隆,通過(guò)對(duì)突變克隆的測(cè)序分析,正確的突變可以應(yīng)用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
基因定點(diǎn)突變常用于研究基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控、RNA或蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,以及用于質(zhì)粒中部分序列的微調(diào)等。
本試劑盒使用了新的保真性更強(qiáng),靈敏度更高,擴(kuò)增速度可達(dá)2kb/min,擴(kuò)增長(zhǎng)度可達(dá)12kb的BeyoFusion™ DNA Polymerase,從而大大縮短了突變反應(yīng)所需的時(shí)間,進(jìn)一步提高了基因定點(diǎn)突變的成功率。同時(shí)進(jìn)一步嚴(yán)格驗(yàn)證了試劑盒中的DpnI,確保能在5分鐘內(nèi)充分消化掉甲基化的模板質(zhì)粒,同時(shí)不會(huì)消化未甲基化的PCR產(chǎn)物。
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