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聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)實驗反應(yīng)體系各組份解析2024/10/28
聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)是在體外進行的由引物介導(dǎo)的酶促DNA擴增反應(yīng)。PCR的原理是在模板DNA、PCR引物、四種脫氧核糖核苷酸(dNTP)及適當濃度的Mg2+存在的條件下，依賴于DNA聚合酶的體外...
抗體是如何制備的？2024/10/21
抗體是機體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護作用的蛋白質(zhì)，由漿細胞(效應(yīng)B細胞)分泌。抗體可以分為多克隆抗血清、單克隆抗體和重組抗體，除了合成重組抗體外，幾乎所有的抗體都來自于用免疫原對實驗動物進行主動免...
ELISA實驗操作質(zhì)控全方面探討2024/10/14
在ELISA的研發(fā)制備中尤為重要的就是它的指控流程，包括抗原設(shè)計及制備篩選，抗體制備，標準品的定量，檢測液的優(yōu)化，試劑盒的組裝，以及各種性能的驗證。對于科研工作者來說，要制備一個好的ELISAkit，...
聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）引物設(shè)計解析2024/10/9
聚合酶鏈式反應(yīng)（PolymeraseChainReaction，PCR）是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，為常用的分子生物學(xué)技術(shù)之一。其基本步驟是，首先將待擴增的模板DNA變性使之成為單鏈，DN...
各類型牛血清不同點合集2024/9/29
血清是血漿凝固后分離出來的液體。當血漿在離心過程中凝固后，血漿中的凝血因子會被消耗掉，形成透明液體的血清。因此，血清中不含凝血因子，但含有血漿中其他的成分，如蛋白質(zhì)、電解質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)等。常見的血清有胎...
PCR檢測試劑盒?反應(yīng)失敗的原因及解決方法2024/9/24
PCR(PolymeraseChainReaction)-聚合酶鏈式反應(yīng)，可以選擇性擴增一段DNA序列。其基本步驟是，首先將待擴增的模板DNA變性使之成為單鏈，DNA樣品中，特異性的引物能夠與其互補的...
蛋白質(zhì)免疫印跡法（WB)）實驗問題解答2024/9/18
蛋白質(zhì)免疫印跡法（WesternBlot）它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實驗方法，基本原理是經(jīng)過PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)分離的蛋白質(zhì)樣品，轉(zhuǎn)移到固相載體例如硝酸纖維素薄膜（NC...
熒光定量PCR（Rt-PCR）實驗中使用的對照分析2024/9/9
熒光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR擴增反應(yīng)體系中加入熒光基團，通過對擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。對照的目的是對檢測的...
ELISA試劑盒實驗包被問題解答2024/9/2
在使用ELISA試劑盒進行實驗的時候，需要注意很多問題，比如溫育、顯色、包被等問題。其中，包被是要特別注意的一個問題，直接關(guān)系到實驗的效果。一、包被的方式將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating...
細胞培養(yǎng)中細胞不貼壁全面分析2024/8/26
大多數(shù)的哺乳動物細胞在體內(nèi)和體外均附著于一定的底物而生長，在體外時這些底物可以是其他細胞、膠原、玻璃或塑料等。貼壁的過程：細胞首先分泌細胞外基質(zhì)，這種細胞外基質(zhì)黏附在支持物的表面（培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)皿的底面...
提高RT-PCR反應(yīng)體系的靈敏度方式解讀2024/8/19
RT-PCR(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction)，也稱為逆轉(zhuǎn)錄PCR，是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)...
PCR反應(yīng)擴增產(chǎn)物平端連接法實驗詳述2024/8/12
實驗原理：平頭連接是將制備好的平頭載體和補平或削平的PCR產(chǎn)物直接進行連接。載體可用EcoRV或SmaI切成平頭；PCR產(chǎn)物純化后，可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min（利用該酶所具有的3’→5...
實時熒光定量 PCR 引物和探針的儲存2024/8/5
聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)是分子生物學(xué)領(lǐng)域功能*的技術(shù)之一。實時熒光定量PCR是在標準PCR技術(shù)基礎(chǔ)上演變而成，常用于定量樣本中的DNA或RNA。利用熒光探針或熒光DNA結(jié)合染料，采用實時熒光定量PCR...
生化試劑盒應(yīng)用注意事項匯總2024/7/30
通常生化試劑盒可分為液體單試劑和液體雙試劑，前者特別適用于半自動生化分析儀和小型自動生化分析儀，使用方便，缺點是穩(wěn)定性較差。與單試劑相比，雙試劑提高了抗干擾能力，具有穩(wěn)定性能較好，可消除樣品自身空白等...
細胞培養(yǎng)優(yōu)點與基本要求匯集2024/7/22
細胞常規(guī)培養(yǎng)是在細胞房中進行，在超凈工作臺或生物安全柜中，把細胞處理好，根據(jù)需要加入細胞培養(yǎng)基，放入細胞培養(yǎng)瓶/皿或細胞培養(yǎng)板中，再放到帶有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：1.研究...
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