抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)既可在機(jī)體內(nèi)進(jìn)行，也可以在機(jī)體外進(jìn)行。在機(jī)體內(nèi)，當(dāng)免疫細(xì)胞被抗原激活后，由B細(xì)胞分化成熟為漿細(xì)胞后所合成、分泌的一類能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白（immunoglobulin，Ig），激活補(bǔ)體系統(tǒng)從而解除抗原對機(jī)體的損傷。

抗原抗體反應(yīng)的主要特點(diǎn)有：

1、特異性：特定的抗體只能與特定的抗原（肽段/蛋白）結(jié)合，這在WB一抗二抗的種屬及反應(yīng)性的選擇常用到；

2、比例性：抗原抗體在整個(gè)反應(yīng)中存在一定的量比關(guān)系，只有當(dāng)二者濃度比例適當(dāng)時(shí)才出現(xiàn)可見反應(yīng)；WB中蛋白上樣量和一抗二抗的稀釋比例與此有關(guān)，實(shí)際操作中抗體的量相對較多，這也是為何抗體可以反復(fù)使用的原因之一；

3、可逆性：抗原抗體的結(jié)合是非共價(jià)結(jié)合，在一定條件下這種非共價(jià)結(jié)合是可逆的；因此，同一NC膜/PVDF膜在Stripping（抗體洗脫）以后可以用來檢測其他蛋白；

4、階段性：抗原抗體特異性反應(yīng)分兩階段，第一階段反應(yīng)迅速，第二階段反應(yīng)緩慢，兩階段均為特異性結(jié)合；WB中抗原抗體結(jié)合在室溫下，反應(yīng)1小時(shí)結(jié)合大約可達(dá)95%，2小時(shí)大約可達(dá)97%以上；反應(yīng)4-6小時(shí)大約可達(dá)90%，8小時(shí)大約可達(dá)95%。