1971年瑞典學者Engvail和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發(fā)展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法，即酶聯(lián)免疫吸附測定法 (enzyme-linked immuno sorbent assay , ELISA) 。ELISA已成為分析化學領域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術( immunoenzymatic techniques ) 的基礎上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術 。

一、基本原理

它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接，然后通過酶與底物產生顏色反應，用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。

在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑) ②酶標記的抗原或抗體(標記物)③酶作用的底物(顯色劑)

測量時，抗原(抗體)先結合在固相載體上，但仍保留其免疫活性，然后加一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯(lián)物(標記物)，此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性，當偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應結合后，再加上酶的相應底物，即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。

其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。 這種有色產物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察，也可以用分光光度計(酶標儀)加以測定。其方法簡單，方便迅速，特異性強。

二、分類

該法由種類和變化可分為以下幾種:

(一)雙抗體夾心法

(二)間接法

(三)競爭法

(四)雙位點一步法

(五)捕獲法測IgM抗體

(六)應用親和素和生物素的ELISA

三、特點

該法相較其他方法而言，有幾大特點

1. 靈敏性高

該測定法的靈敏度來自作為報告基團的酶。酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應 ，產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。ELISA實現了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在微克、甚至納克水平上對其進行定量。

2. 特異性強

其特異性來自抗體或抗原的選擇性?？乖贵w的結合實質上只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結合位點之間。由于兩者在化學結構和空間構型上呈互補關系，所以抗原抗體反應具有高度的特異性。