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大豆PCR檢測試劑盒使用方法
1.擴增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
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2.樣本處理(樣本處理區(qū))
1.1.先對痰液樣本進(jìn)行目測,若樣本中唾液占大部分,則需重新采集樣本。
1.2.目測合格后,在樣本中加入2~3倍體積4%的NaOH溶液,<采希?50rpm、37℃條件下處理30min或常溫下1Hr,使其充分液化(無明顯固狀物并且吸出時無拖絲現(xiàn)象即為液化*;若液化不*,可適當(dāng)再加入少量4%的NaOH溶液直至液化*)。
1.3.取液化后的樣本900ul以及試劑盒中的陰性對照、強陽性對照和臨陽性對照各500ul于1.5ml無菌離心管中,13,000rpm離心10min。
1.4.棄上清(先倒出大部分液體,再用移液器盡量吸干至無明顯液滴為止),沉淀中加入1ml滅菌生理鹽水,大豆RR PCR檢測試劑盒振蕩懸?。ㄗ⒁猓喊淳o離心管蓋后,橫向按在旋渦振蕩器上將沉淀振起),13,000rpm離心10min。
1.5.棄上清,用1ml滅菌生理鹽水洗滌沉淀,13,000rpm離心10min。
1.6.棄上清,向沉淀中加入DNA提取液30ul,振蕩混勻,2,000rpm離心5sec,放37℃溫浴30min,再放入100℃水浴/干浴10min,13,000rpm離心10min,保留上清備用。(如果樣本裂解產(chǎn)物當(dāng)天不使用,請于-20℃保存。)
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