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人ELISA試劑盒特性:
特異性:大鼠ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的要害組分、抗體對有關,若抗體對中為多抗,另一個有必要為單抗,建議運用雙單抗;
簡便性:在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下,實驗時間越短,操作越便利,越簡略遭到用戶等候,這也無妨作為選擇試劑盒的一個方針;
簡易:以簡略的一步反應取代慣例法的五個進程;
通用:適合于絕大多數(shù)一級抗體,并且不需要二級抗體反應;
便利:以1個小時取代慣例法的3-5個小時;
活絡:具有與慣例法相似的活絡度;
重現(xiàn)性好:實驗成果重現(xiàn)性好;
經(jīng)濟:抗體和試劑可重復運用4-5次。
人ELISA試劑盒操作步驟
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,置37℃反應30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
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