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小鼠ELISA試劑盒原理:
本小鼠ELISA試劑盒系由預包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬瘟病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬瘟病毒抗體,則將與酶標板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬瘟病毒抗體。
小鼠ELISA試劑盒技術原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面a的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為小鼠ELISA試劑盒有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
小鼠ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或小鼠ELISA試劑盒生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
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