大家在實(shí)驗(yàn)中多多少少會(huì)有些問(wèn)題出現(xiàn)，復(fù)孔的稀釋步驟也不例外。那么ELISA檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中復(fù)孔的稀釋到底有多關(guān)鍵呢？近日，有位客戶來(lái)電表明了自己的實(shí)驗(yàn)疑惑：“設(shè)計(jì)ELISA復(fù)孔檢查時(shí)，是對(duì)同一個(gè)樣品作兩次稀釋，再分別加到板上的兩個(gè)孔，還是只稀釋一次，然后吸取兩次分別加到兩個(gè)孔？前者似乎把稀釋時(shí)的誤差也考慮到了，但做出來(lái)的結(jié)果兩個(gè)孔相關(guān)挺大的。而較常使用的是哪種稀釋方法？”

為了減小誤差，是先稀釋再加樣。而針對(duì)這位客戶所遇到的疑問(wèn)，上海撫生生物公司技術(shù)人員是這樣解說(shuō)的：

1. 前者測(cè)的是稀釋和移液的誤差，后者只有移液誤差。

2. 一般都是稀釋一次，分兩孔吧。同濃度的分復(fù)孔。

3. 由于是從同一原液稀釋，一般不考慮稀釋誤差(稀釋誤差是存在的)，都是稀釋到想要的倍數(shù)直接分孔(而不是一一稀釋，這樣可以使稀釋誤差減小)。

 4. 復(fù)孔是為了排除移液體積，板的影響，以及其他系統(tǒng)誤差的，要求復(fù)孔的濃度是一致的。稀釋后分孔能滿足此要求，一一稀釋不能。