酶聯(lián)免疫吸附試驗ELISA試劑盒使用原理

    ELISA試劑盒的原理是?抗原與抗體的特異性結(jié)合+酶催化顯色放大?，通過顏色深淺定量檢測目標(biāo)物的含量。

    基礎(chǔ)流程

    先將已知抗原/抗體固定在微孔板等固相載體表面，加入待測樣本后，樣本中的對應(yīng)抗體/抗原會與固相載體上的物質(zhì)發(fā)生特異性結(jié)合，再加入酶標(biāo)記的抗體，形成免疫復(fù)合物。

    信號放大與定量

    酶標(biāo)記物中的酶可催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，比如TMB底物會從無色變?yōu)樗{色，加終止液后轉(zhuǎn)為穩(wěn)定黃色，顏色深淺與目標(biāo)物濃度正相關(guān)，通過酶標(biāo)儀讀取450nm波長下的吸光度值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線就能算出待測物的準(zhǔn)確含量。

    不同檢測模式適配場景

    雙抗體夾心法：用兩個抗體“夾住"大分子抗原，適合檢測蛋白質(zhì)、抗原等，靈敏度和特異性高。

    競爭法：適配激素、藥物等小分子物質(zhì)，樣本中目標(biāo)物越多，最終顯色越淺。

    間接法：多用于抗體檢測，比如疫苗效價測定，通過酶標(biāo)二抗放大信號。

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