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純化小技巧 | 多模式層析填料MaXtar® MMA的多元化應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2024-4-25
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近年來,多模式層析
 
已經(jīng)在生物制藥行業(yè)得到有效應(yīng)用
 

 

 
  比于傳統(tǒng)的單一層析模式,多模式層析填料的配基可以表現(xiàn)出多種不同模式的作用力,在一個(gè)步驟中實(shí)現(xiàn)對各種類型雜質(zhì)的選擇性清除,從而提高回收率和產(chǎn)品質(zhì)量。MaXtar® MMA是百林科層析填料家族中的一款多模式陰離子填料,高性能的 MaXtar® 瓊脂糖基架與多模式配基相結(jié)合,已經(jīng)在生物制藥多個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用。

 

 
  MaXtar® MMA產(chǎn)品簡介  
 
  MaXtar® MMA (平均粒徑75μm),填料由多個(gè)不同性質(zhì)的基團(tuán)組成:氨基、氫鍵和疏水基團(tuán)。該層析介質(zhì)可以去除聚集體、核酸、宿主蛋白、病毒等主要雜質(zhì),廣泛應(yīng)用于抗體、重組蛋白或疫苗等領(lǐng)域。具有明顯的性能優(yōu)勢:
 
  (1) 改良的 MaXtar® 基架具有更強(qiáng)剛性,因此在較低的反壓下能夠?qū)崿F(xiàn)更高工藝流速,提高工藝效率。
 
  (2) 高動態(tài)載量,一步結(jié)合大部分雜質(zhì),節(jié)約時(shí)間和成本。
 
  (3) 耐受廣泛的 pH 和電導(dǎo)率范圍,有助于摸索最優(yōu)工藝條件。
 
  (4)多用于挑戰(zhàn)性樣品的純化,尤其對聚集體去除表現(xiàn)突出。

圖1:MaXtar® MMA壓力流速曲線(D:300 mm*H:230 mm)

 
  MaXtar® MMA應(yīng)用案例  
 
案例一:MaXtar® MMA在抗體中的應(yīng)用
 
  樣品信息:雙抗樣品
 
  預(yù)平衡Buffer: 50 mM NaAc-HAc ,pH 4.0
 
  平衡Buffer: 50 mM NaAc-HAc,125 mM NaCl, pH 5.0
 
  上樣:雙抗陰離子收獲液(醋酸調(diào)節(jié)pH調(diào)節(jié)到5.1)(載量40 mg/ml)
 
  淋洗Buffer: 50 mM Tris-HCl,pH5.0

圖2:MaXtar® MMA層析圖譜

 

圖3:MaXtar® MMA層析前后
SEC-HPLC檢測圖譜

 
  小結(jié):結(jié)合層析圖譜和SEC-HPLC檢測圖譜可見,純度由91.8%提升至99.5%,雙抗的聚集體含量由 6% 下降到至 0.5%,聚集體去除明顯。
 
案例二:MaXtar® MMA在疫苗中的應(yīng)用
 
  樣品信息:輪狀疫苗
 
  平衡Buffer: 1.4 M(NH4)2SO4,50 mM PB,pH 6.5
 
  洗雜Buffer: 1.3 M(NH4)2SO4,50 mM PB,pH 6.5
 
  洗脫Buffer: 0.9 M(NH4)2SO4,50 mM PB,pH 6.5

圖4:MaXtar® MMA層析圖譜和電泳圖譜

 
  小結(jié):通過層析圖譜和電泳檢測可見,純度有明顯提高,雜質(zhì)去除明顯。
 
  MaXtar® MMA已經(jīng)成功應(yīng)用于多個(gè)臨床和商業(yè)化階段項(xiàng)目,有效支持不同商業(yè)化規(guī)模的抗體和重組蛋白生產(chǎn)。

 

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