純化小技巧| 多模式層析填料的選擇及其應用

發(fā)布時間：2023-7-20

　　在生物制藥純化過程中，通常有3~5步層析步驟。一般來說，這些步驟使用了不同的分離模式，如親和、離子交換、凝膠過濾和疏水相互作用等。過去的十年中，由于微生物和哺乳動物細胞培養(yǎng)技術的發(fā)展，促進表達量顯著提高，間接增加下游純化的挑戰(zhàn)。兼具兩種或多種層析原理的多模式層析填料，成為純化的新選擇。

　　下面為大家介紹百林科幾款多模式填料產品性能和應用案例。

　　陰離子+疏水多模式系列產品

　　MaXtar MMA (平均粒徑75μm)和MaXtar MMA HR(平均粒徑40μm)，兩款填料由多個不同性質的基團組成：氨基、氫鍵和疏水基團。該層析介質可以去除聚集體、核酸、宿主蛋白、病毒等主要雜質，廣泛應用于多糖、抗體、病毒載體或疫苗領域。具有明顯的性能優(yōu)勢：

　　• 改良的 MaXtar 基架具有更強剛性，因此在較低的反壓下能夠實現更高工藝流速，提高工藝效率。

　　• 高動態(tài)載量，一步結合大部分雜質，節(jié)約時間和成本。

　　• 耐受廣泛的 pH 和電導率范圍，有助于摸索最優(yōu)工藝條件。

　　• 多用于挑戰(zhàn)性樣品的純化，尤其對聚集體去除表現突出。

　　陽離子+疏水多模式系列產品

　　MaXtar MMC (平均粒徑75μm)和MaXtar MMC HR(平均粒徑40μm)，兩款填料由多個不同性質的基團組成：羧基、氫鍵和疏水基團。該層析介質能在高電導率環(huán)境下，依然保持對帶正電的生物分子的結合能力，便于前序高鹽洗脫或高鹽預處理后樣品的分離純化。具有明顯的性能優(yōu)勢：

　　• 改良的 MaXtar 基架具有更強剛性，因此在較低的反壓下能夠實現更高工藝流速，提高工藝效率。

　　• 在高電導率環(huán)境下，依然保持高動態(tài)載量，省去緩沖液置換操作，提高收率，節(jié)約成本。

　　• 更小的粒徑可以為層析工藝提供更高的分辨率，使產物的純度更高。

　　???應用案例

　　案例一：MaXtar MMA流穿模式去除聚集體

　　• 預平衡Buffer: 50 mM NaAc-HAc , pH 4.0

　　• 平衡Buffer: 50 mM NaAc-HAc, 125 mM NaCl， pH 5.0

　　• 上樣：雙抗陰離子收獲液(醋酸調節(jié)pH調節(jié)到5.1)(載量40 mg/ml)

　　• 淋洗Buffer: 50 mM Tris-HCl, pH5.0