在生物制藥純化過程中，通常有3~5步層析步驟。一般來說，這些步驟使用了不同的分離模式，如親和、離子交換、凝膠過濾和疏水相互作用等。過去的十年中，由于微生物和哺乳動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展，促進表達量顯著提高，間接增加下游純化的挑戰(zhàn)。兼具兩種或多種層析原理的多模式層析填料，成為純化的新選擇。
下面為大家介紹百林科幾款多模式填料產(chǎn)品性能和應(yīng)用案例。
陰離子+疏水多模式系列產(chǎn)品
MaXtar MMA (平均粒徑75μm)和MaXtar MMA HR(平均粒徑40μm)，兩款填料由多個不同性質(zhì)的基團組成：氨基、氫鍵和疏水基團。該層析介質(zhì)可以去除聚集體、核酸、宿主蛋白、病毒等主要雜質(zhì)，廣泛應(yīng)用于多糖、抗體、病毒載體或疫苗領(lǐng)域。具有明顯的性能優(yōu)勢：
• 改良的 MaXtar 基架具有更強剛性，因此在較低的反壓下能夠?qū)崿F(xiàn)更高工藝流速，提高工藝效率。
• 高動態(tài)載量，一步結(jié)合大部分雜質(zhì)，節(jié)約時間和成本。
• 耐受廣泛的 pH 和電導(dǎo)率范圍，有助于摸索最優(yōu)工藝條件。
• 多用于挑戰(zhàn)性樣品的純化，尤其對聚集體去除表現(xiàn)突出。
陽離子+疏水多模式系列產(chǎn)品
MaXtar MMC (平均粒徑75μm)和MaXtar MMC HR(平均粒徑40μm)，兩款填料由多個不同性質(zhì)的基團組成：羧基、氫鍵和疏水基團。該層析介質(zhì)能在高電導(dǎo)率環(huán)境下，依然保持對帶正電的生物分子的結(jié)合能力，便于前序高鹽洗脫或高鹽預(yù)處理后樣品的分離純化。具有明顯的性能優(yōu)勢：
• 改良的 MaXtar 基架具有更強剛性，因此在較低的反壓下能夠?qū)崿F(xiàn)更高工藝流速，提高工藝效率。
• 在高電導(dǎo)率環(huán)境下，依然保持高動態(tài)載量，省去緩沖液置換操作，提高收率，節(jié)約成本。
• 更小的粒徑可以為層析工藝提供更高的分辨率，使產(chǎn)物的純度更高。
???應(yīng)用案例
案例一：MaXtar MMA流穿模式去除聚集體
• 預(yù)平衡Buffer: 50 mM NaAc-HAc , pH 4.0
• 平衡Buffer: 50 mM NaAc-HAc, 125 mM NaCl， pH 5.0
• 上樣：雙抗陰離子收獲液(醋酸調(diào)節(jié)pH調(diào)節(jié)到5.1)(載量40 mg/ml)
• 淋洗Buffer: 50 mM Tris-HCl, pH5.0
圖1： MaXtar MMA層析圖譜
圖2： MaXtar MMA層析前后SEC-HPLC檢測圖譜
小結(jié)：結(jié)合層析圖譜和SEC-HPLC檢測圖譜可見，純度由91.8%提升至99.5%，雙抗的聚集體含量由 6% 下降到至 0.5%，聚集體去除明顯。
案例二：MaXtar MMC流穿模式去除聚集體
• 平衡Buffer: 50 mM NaAc-HAc, 225 mM NaCl ，pH 5.5
• 上樣：雙抗親和收獲液(調(diào)節(jié)pH調(diào)節(jié)到5.5)(載量40 mg/ml)
• 淋洗Buffer: 50 mM NaAc-HAc, 225 mM NaCl， pH 5.5
圖3： MaXtar MMC層析圖譜
圖4： MaXtar MMC層析前后SEC-HPLC檢測圖譜
小結(jié)：通過層析圖譜和SEC-HPLC檢測圖譜可見，純度由96.5%提升至99.7%，雙抗的聚集體含量由 3.5% 下降到至 0.3%，聚集體去除效果同樣明顯。
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