人抑胃肽酶聯(lián)檢測(cè)試劑盒，進(jìn)口試劑盒，科潤(rùn)達(dá)生物進(jìn)口代理
人抑胃肽酶聯(lián)檢測(cè)試劑盒找科潤(rùn)達(dá)生物，定量檢測(cè)支持科研代測(cè)，此次介紹的試劑盒是抑胃肽酶聯(lián)。抑胃肽的英文是gastric inhibitory polypeptide.GIP。抑胃肽酶聯(lián)的方法可以確認(rèn)人的正常血清濃度為349±18ng/L，餐后45分鐘可增至1200ng/L,3小時(shí)內(nèi)仍維持在1000ng/L以上?？茲?rùn)達(dá)生物供應(yīng)抑胃肽酶聯(lián)法的進(jìn)口試劑盒。
預(yù)期用途
僅供科研用
此試劑盒能用于EDTA-血漿中人活性型抑胃肽(GIP)的定量檢測(cè)。
樣品收集后需加入二肽基肽酶IV(DPP-IV)抑制劑，或用特定的方法，確保抑胃肽的完整性。
抑胃肽酶聯(lián)科研試劑盒成分
1 包被板: 抗體IgG，親合純化 96T
2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記 0.4mL x 1
3 標(biāo)準(zhǔn)品: 人GIP (1-42) 0.5mL x 2
4 EIA緩沖液: 含1% BPS 30mL x 1
5 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 終止液: 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: 1% BSA，0.05%吐溫 50mL x 1
人抑胃肽酶聯(lián)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備
1) 洗滌液的準(zhǔn)備
試劑盒的洗滌液是一種40倍濃縮液，用1950 mL稀釋50 mL的濃縮洗滌液，制成2000mL即用稀釋洗滌液。置于冰箱內(nèi)可保存2周。
2) 酶標(biāo)記抗體的準(zhǔn)備
試劑盒中的標(biāo)記抗體是一種30倍濃縮物，根據(jù)所需量用標(biāo)記抗體稀釋液稀釋。
示例:
如果你用一條板(8孔)，就需800 μL。的標(biāo)記抗體。就用870 μL的標(biāo)記抗體稀釋液稀釋30 μL濃縮液，充分混勻。并每孔各加100 μL。
濃縮酶標(biāo)記抗體需稀釋后才能用于抑胃肽酶聯(lián)的實(shí)驗(yàn)。
剩余的稀釋標(biāo)記抗體液需密封瓶裝，存于4°C。
3) 標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備
加0.5 mL的去離子水到瓶裝標(biāo)準(zhǔn)品，制成200 pg/mL的人GIP標(biāo)準(zhǔn)品液。
4) 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋
準(zhǔn)備8支試管，并每支各加230 μL EIA緩沖液。稀釋成如下濃度，步驟如下圖所示:
試管1 100 pg/mL
試管2 50 pg/mL
試管3 25 pg/mL
試管4 12.5 pg/mL
試管5 6.3 pg/mL
試管6 3.1 pg/mL
試管7 1.6 pg/mL
試管8 0 pg/mL(樣品空白對(duì)照)
吸取230ul的標(biāo)準(zhǔn)品液于1號(hào)管混勻，然后從1號(hào)管吸取230ul加入2號(hào)管混勻，如下圖所示，按此規(guī)律稀釋，第8號(hào)管為0 pg/mL作為樣品空白對(duì)照。
5) 樣品稀釋
樣品如需稀釋時(shí)，必須用EIA緩沖液進(jìn)行稀釋
如果樣品中人GIP的濃度范圍一無(wú)所知的話，預(yù)先準(zhǔn)備幾個(gè)不同稀釋濃度的樣品液來(lái)確定理想的檢測(cè)濃度。
3實(shí)驗(yàn)步驟
使用前，將所有試劑應(yīng)平衡至室溫，大約30min，充分混勻，確保試劑質(zhì)量無(wú)改變，標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品檢測(cè)必須同時(shí)進(jìn)行。檢測(cè)后標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)曲線如圖：
結(jié)果計(jì)算
所有抑胃肽酶聯(lián)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)(包括標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)樣品的OD值)，都應(yīng)減去樣品空白對(duì)照的OD值。
在log-log坐標(biāo)紙用，以較正的OD值為縱坐標(biāo)，相對(duì)應(yīng)的濃度為橫坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品直接在標(biāo)準(zhǔn)曲線上獲取濃度值。
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