【??參數(shù)信息】

英文名稱：Ar A4 Electrocompetent Cell 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

中文名稱：Ar A4農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

形態(tài)：冷凍懸浮液；

特性：適合大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、天然卡na霉素抗性、轉(zhuǎn)化效率>10?–10? cfu/μg DNA；

規(guī)格：10×50μl 、50×50μl

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】

Ar A4 Electrocompetent Cell，Ar A4農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞是一種發(fā)根農(nóng)桿菌（Agrobacterium rhizogenes）菌株Ar A4的電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞。

具有以下核心特征：

天然質(zhì)粒：含有農(nóng)桿堿型（agropine type）Ri質(zhì)粒，賦予其廣泛的宿主范圍（如玉米、煙草、胡蘿卜等植物）及kan^R。

特殊工藝：通過電轉(zhuǎn)化專用工藝制備，細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)，適合大質(zhì)粒（如雙元載體）的轉(zhuǎn)化。

適用性：用于電轉(zhuǎn)化（非化學(xué)轉(zhuǎn)化），不可用于卡na霉素抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化（因自身具卡那抗性）。

【使用方法】

（一）電轉(zhuǎn)化步驟

混合DNA與細(xì)胞

向50–100 μl感受態(tài)細(xì)胞中加入質(zhì)粒DNA，輕彈管底混勻（避免氣泡），立即放回冰浴。

冰浴靜置15–20分鐘。

電擊操作

將混合液轉(zhuǎn)入預(yù)冷的電擊杯，避免氣泡。

電擊參數(shù)（參考通用農(nóng)桿菌設(shè)置）：

電容：25 μF，電阻：200–2000 Ω，電壓：2.0–2.5 kV。

電擊后迅速放回冰浴1分鐘。

復(fù)蘇培養(yǎng)

立即加入500–700 μl無抗生素的LB/YEB/TY液體培養(yǎng)基（28–30℃預(yù)溫）。

28–30℃振蕩培養(yǎng)2–4小時(shí)（150–200 rpm）。

（二）涂板與培養(yǎng)

菌體收集

4000–6000 ×g離心1分鐘，棄大部分上清，留100 μl液體重懸菌體。

涂布平板

取100 μl菌液涂布于含相應(yīng)抗生素的TY/LB/YEB平板。

倒置平板，28℃培養(yǎng)2–3天。

【相關(guān)試劑】

MPP+ iodide

NAD氧化型輔酶I

DAF-FM DA (5mM in DMSO)

Sodium Nitroprusside(SNP)

S-Nitrosoglutathione(GSNO)

MSU440 Electrocompetent Cell

C58C1 Chemically Competent Cell

AGL1 Chemically Competent Cell

GV3101 Chemically Competent Cell

MSU440 Chemically Competent Cell

LBA4404 Chemically Competent Cell

Acti-stain670phalloidin紅色熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽

ER-TrackerTM Blue-White DPX, for live-cell imaging

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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn)，敬請(qǐng)知悉。