【??參數(shù)信息】
英文名稱:Magenta-Gal β-半乳糖苷酶顯色底物(紅色)
中文名稱:5-溴-6-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷
CAS NO:93863-88-8
分子式:C14H15BrClNO6
分子量:408.63
外觀:白色至類白色粉末或結(jié)晶性粉末
溶解性:溶于DMF,DMSO
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡單概述】
Magenta-Gal β-半乳糖苷酶顯色底物(紅色),Magenta-Gal是β-半乳糖苷酶的特異性顯色底物,用于分子生物學(xué)實(shí)驗中,藍(lán)白斑篩選和重組菌落的鑒定。
其作用機(jī)制基于β-半乳糖苷酶對底物的水解反應(yīng),生成不溶性紅色或品紅色產(chǎn)物,從而在瓊脂平板上形成可見的紅色菌落,便于區(qū)分?jǐn)y帶lac+表型和lac-表型的細(xì)菌。
作用機(jī)制
(1)水解反應(yīng):當(dāng)含有Magenta-Gal的培養(yǎng)基與具有β-半乳糖苷酶活性的細(xì)菌共培養(yǎng)時,β-半乳糖苷酶會催化Magenta-Gal的水解,將其分解為半乳糖和氯溴靛藍(lán)。
該產(chǎn)物不溶于乙醇和二甲苯,會在菌落周圍形成紅色沉淀,使lac+菌落呈現(xiàn)深紅色。
(2)篩選應(yīng)用:在藍(lán)白斑篩選中,Magenta-Gal替代傳統(tǒng)的X-Gal。
通過與IPTG聯(lián)合使用,可誘導(dǎo)lac操縱子表達(dá)β-半乳糖苷酶,從而實(shí)現(xiàn)對重組DNA插入片段的檢測。
若外源DNA插入質(zhì)粒破壞了α互補(bǔ)結(jié)構(gòu),菌落將呈現(xiàn)白色;若未插入,則呈現(xiàn)紅色。
(3)其他應(yīng)用:除平板篩選外,Magenta-Gal還可用于免疫印跡和免疫細(xì)胞化學(xué)實(shí)驗,因其生成的紅色沉淀易于觀察和定量分析。
【應(yīng)用領(lǐng)域】
(1)分子生物學(xué)研究
重組DNA篩選:廣泛應(yīng)用于藍(lán)白篩選實(shí)驗,驗證質(zhì)粒載體是否成功插入外源DNA片段。
基因表達(dá)分析:通過檢測β-半乳糖苷酶活性,研究基因啟動子活性或轉(zhuǎn)錄調(diào)控。
(2)細(xì)胞生物學(xué)與衰老研究
衰老細(xì)胞標(biāo)記:在特定條件下,衰老細(xì)胞會表達(dá)β-半乳糖苷酶,Magenta-Gal可作為替代X-Gal的顯色底物,用于組織切片或細(xì)胞培養(yǎng)中的衰老細(xì)胞檢測。
活體成像:結(jié)合熒光探針,實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶活性的實(shí)時熒光成像,用于腫瘤模型或神經(jīng)退行性疾病研究。
(3)組織化學(xué)染色
用于固定組織或細(xì)胞的β-半乳糖苷酶活性檢測,通過紅色沉淀標(biāo)記酶活性位點(diǎn),輔助病理學(xué)研究。
【相關(guān)試劑】
IPTG異丙基-β-D-硫代半乳糖苷
Azo Dye-3 PEG 10 炔烴
Mag-520 Potassium Salt
Cell Meter 細(xì)胞活性檢測試劑盒
PropidiumMonoazide(PMA)
BMPO(Spin trapping reagent)
Bluo-Gal β-半乳糖苷酶顯色底物(藍(lán)色)
MUG 4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸
Magenta-Gal β-半乳糖苷酶顯色底物(紅色)
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
BGAL-Streptavidinβ-半乳糖苷酶標(biāo)記鏈霉親和素
FDG(Fluorescein di(β-D-galactopyranoside))熒光素二(β-D-吡喃半乳糖苷)
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本試劑僅適用于科研實(shí)驗,敬請知悉。












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