【??參數(shù)信息】
中英文名稱:Recombinant Lysyl Endopeptidase 重組賴氨酰內(nèi)切酶
EC NO:3.4.21.50
級(jí)別:生化級(jí)(Biochemistry Grade)
分子量:29±2.5 kDa(SDS-PAGE)
純度:?jiǎn)我粭l帶(SDS-PAGE)
外觀:類白色或白色粉末
合適pH:9.0-9.5
等電點(diǎn):6.9-7.0
合適溫度:30-37℃,50℃以上穩(wěn)定性下降
穩(wěn)定性:在 4mol/L 尿素或0.2%SDS 溶液中 30℃孵育 6h后,生物活性未發(fā)生降低。穩(wěn)定性較好。
抑制劑:DFP、PMSF、TLCK
酶活力:≥0.5AU /mg powder
細(xì)菌內(nèi)毒素:≤10EU/mg powder
純度:≥95%
儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡(jiǎn)單概述】
重組賴氨酰內(nèi)切酶屬于絲an酸蛋白酶,特異性切割賴an酸殘基羧基端的肽鍵。
Recombinant Lysyl Endopeptidase用于各種生物技術(shù)過(guò)程中,如:蛋白質(zhì)酶解生產(chǎn)多肽;GLP-1類藥物制備等。生物活性受 DFP、PMSF、TLCK 抑制,不被TACK抑制。
本品為大腸桿菌重組表達(dá)所得,無(wú)外源性的病毒污染,生產(chǎn)過(guò)程中不使用任何動(dòng)物源的原料。
基于穩(wěn)定的重組生產(chǎn)工藝,可批量生產(chǎn),批次間幾乎無(wú)差異,質(zhì)量穩(wěn)定,且純度高,低內(nèi)毒素水平。
功能特性
特異性識(shí)別位點(diǎn):專一性切割蛋白質(zhì)或多肽鏈中Lys殘基羧基端的肽鍵,對(duì)Arg殘基的切割能力極低。
活性中心:其活性位點(diǎn)包含 S1 袋,該結(jié)構(gòu)狹窄且細(xì)長(zhǎng),僅能容納線性側(cè)鏈的賴an酸殘基,而精an酸的胍基因空間位阻效應(yīng)無(wú)法進(jìn)入。
此外,活性位點(diǎn)的 Asp225 殘基與底物結(jié)合密切相關(guān)。
非特異性切割:部分研究指出其可能具有微量的非特異性切割能力,但整體特異性高于其他蛋白酶。
【應(yīng)用領(lǐng)域】
(1)生物制藥與藥物研發(fā)
多肽與蛋白質(zhì)生產(chǎn):用于胰島素類似物和GLP-1類藥物的制備,通過(guò)酶切重組人前胰島素生成目標(biāo)肽段。
藥物質(zhì)量檢測(cè):在抗體類藥物的生產(chǎn)中,用于磷酸化肽鑒定、二硫鍵分析和N-聚糖分析,確保藥物結(jié)構(gòu)一致性。
酶催化合成:用于Lys-X化合物的合成,如短肽YDDDDKRGWK的特異性酶切。
(2)蛋白質(zhì)組學(xué)研究
蛋白質(zhì)測(cè)序:在質(zhì)譜分析中,通過(guò)酶切蛋白質(zhì)生成肽段,輔助鑒定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和修飾位點(diǎn)。
復(fù)雜蛋白處理:在疏水性強(qiáng)或難溶性蛋白的酶切中,可通過(guò)添加變性劑(如尿素)或封閉二硫鍵提高效率。
(3)工業(yè)生產(chǎn)與質(zhì)量控制
高產(chǎn)量與穩(wěn)定性:通過(guò)大腸桿菌重組表達(dá)系統(tǒng),可實(shí)現(xiàn)連續(xù)批次生產(chǎn),單批次產(chǎn)量可達(dá)20g以上,且批間差異小。
配套技術(shù):提供固定化RLys-C,耐壓性能好,可循環(huán)回收使用,減少殘留風(fēng)險(xiǎn)。
【相關(guān)試劑】
Human Ox-HDL
Sulfo-Cy3羧酸
Angiotensin (1-7)
鈣螯合劑,126824-24-6
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iFluor 620 succinimidyl ester iFluor 620琥珀酰亞胺酯
iFluor 570 succinimidyl ester iFluor 570 琥珀酰亞胺酯
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Cyanine 5 monoacid [equivalent to Cy5 acid] Cy5,酸
Cyanine 3.5 acid [equivalent to Cy3.5 acid] Cy3.5 酸
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