【??參數(shù)信息】

英文名稱：Interferon alpha 2/IFNA2 Protein, Human, Recombinant

其他名稱：Human Recombinant干擾素alpha 2

表達(dá)宿主：酵母

物種：人類

預(yù)測(cè)N末端：Cys 24

分子量：重組人IFNA2A由165個(gè)氨基酸組成，分子量為19.3kDa。

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】

Human Recombinant干擾素alpha 2基本特征

分子量：約19.3 kDa（酵母表達(dá)）

大腸桿菌表達(dá)時(shí)因含His標(biāo)簽增至21.6–23.1 kDa。

氨基酸組成：全長(zhǎng)165個(gè)氨基酸（C24-E188）。

結(jié)構(gòu)域：含胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜螺旋及胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域，通過(guò)α螺旋折疊形成三維結(jié)構(gòu)。

表達(dá)系統(tǒng)與純度

表達(dá)宿主：酵母、大腸桿菌或HEK293細(xì)胞。

標(biāo)簽：部分含His標(biāo)簽（原核表達(dá)），部分無(wú)標(biāo)簽（真核表達(dá)）。

亞型與變異

主要亞型包括α-2a、α-2b、α-2c：α-2b為主要等位基因，α-2a次之，α-2c為罕見變異。

人類IFN-α家族有至少13種亞型，IFNA2為較早被克隆和應(yīng)用的亞型。

【使用方法】

重組蛋白的復(fù)溶與保存（適用于凍干粉產(chǎn)品）

復(fù)溶方法：

使用無(wú)菌、無(wú)內(nèi)毒素的溶劑，復(fù)溶濃度為 0.1–1.0 mg/mL。避免渦旋震蕩，輕柔移液混勻。

復(fù)溶后分裝：立即使用或分裝為小份，避免反復(fù)凍融。長(zhǎng)期保存需添加載體蛋白以穩(wěn)定活性。

保存條件：

凍干粉：-20°C 至 -80°C 保存，有效期 12個(gè)月 。

復(fù)溶后液體：

短期：2–8°C 保存 1周。

長(zhǎng)期：-20°C 以下保存 3個(gè)月。

穩(wěn)定性驗(yàn)證：37°C 加速降解實(shí)驗(yàn)表明，48小時(shí)內(nèi)活性損失<5% 。

實(shí)驗(yàn)應(yīng)用中的關(guān)鍵步驟

(1) ELISA檢測(cè)（定量IFNA2）

試劑盒操作（以人IFN-α2b ELISA試劑盒為例）：

標(biāo)準(zhǔn)品制備：凍干標(biāo)準(zhǔn)品用1.0 mL稀釋液復(fù)溶，靜置10分鐘混勻，按需梯度稀釋。復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品不可重復(fù)使用。

生物su化抗體工作液：臨用前30分鐘，按1:100比例用抗體稀釋液配制。

檢測(cè)流程：嚴(yán)格遵循雙抗體夾心ELISA步驟（預(yù)包被抗體→加樣→生物su化抗體→顯色），洗滌液需按1:25稀釋濃縮液 。

(2) 細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)（抗病毒/信號(hào)通路研究）

活性驗(yàn)證：

IFNA2通過(guò)JAK-STAT通路發(fā)揮作用，可通過(guò)檢測(cè)STAT1/STAT3磷酸化水平驗(yàn)證活性（如HCT116細(xì)胞模型）。

抗病毒活性：EC50范圍 0.6–4.2 pg/mL。

注意事項(xiàng)：

操作時(shí)穿戴實(shí)驗(yàn)服及手套，避免污染。

實(shí)驗(yàn)前平衡試劑至室溫（20分鐘），確保反應(yīng)體系一致性。

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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn)，敬請(qǐng)知悉。