試劑名稱:Fura-2,AM,CellPermeant鈣離子熒光探針
簡稱:Fura-2 AM鈣離子熒光探針
儲存:-20℃干燥避光保存至少1年,冰袋運(yùn)輸。
產(chǎn)地:西安強(qiáng)化生物
CAS NO:108964-32-5
分子式:C44H47N3O24
分子量:1001.85
一、描述與基本特性
Fura-2 AM鈣離子熒光探針其熒光性質(zhì)隨著與鈣離子的結(jié)合或解離狀態(tài)而變化,這種變化可以反映出細(xì)胞內(nèi)鈣離子的濃度變化。
此外,F(xiàn)ura-2,AM,CellPermeant的結(jié)構(gòu)中包含多個(gè)酯基和酰胺基團(tuán),以及一個(gè)帶有甲基的苯環(huán),這些化學(xué)基團(tuán)共同構(gòu)成了Fura-2的化學(xué)特性。
AM形式的作用機(jī)制與細(xì)胞滲透性
疏水性修飾:AM酯基使探針脂溶性增強(qiáng),可被動擴(kuò)散穿透細(xì)胞膜。
胞內(nèi)活化:被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解,釋放極性分子Fura-2,因帶負(fù)電荷無法外排,滯留胞內(nèi)。
二、光譜特性與鈣離子檢測原理
(一)熒光行為
Fura-2,AM(未水解):
激發(fā)波長:369 nm,發(fā)射波長:478 nm
無鈣響應(yīng)性:熒光強(qiáng)度不隨鈣濃度變化。
(二)Fura-2(水解后):
無鈣狀態(tài):激發(fā)峰380 nm,發(fā)射峰510 nm。
結(jié)合鈣離子:激發(fā)峰藍(lán)移至340 nm,發(fā)射峰穩(wěn)定于505-516 nm。
熒光增強(qiáng):結(jié)合鈣后熒光強(qiáng)度提升60-100倍。
(三)比率檢測優(yōu)勢
原理:計(jì)算340 nm/380 nm激發(fā)下的發(fā)射強(qiáng)度比值(R = F340/F380),與鈣濃度正相關(guān)。
抗干擾性:比值法消除探針負(fù)載不均、細(xì)胞厚度差異及光漂白影響。
定量范圍:K = 345 nM,適配生理鈣波動。
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