【試劑介紹】
Mag-Fura-2 AM，Cell Permeant 熒光探針，是一種胞內(nèi)鎂離子指示劑，屬于紫外激發(fā)的比率型探針，與鎂離子結(jié)合的Kd值為1.9mM。激發(fā)波長歷經(jīng)藍(lán)色遷移從369nm到330nm。
Mag-Fura-2 AM，Cell Permeant 熒光探針具細(xì)胞膜滲透性，只需簡單孵育，即可加載進(jìn)入細(xì)胞。
【技術(shù)參數(shù)】
CAS:130100-20-8
分子式：C30H30N2O19
分子量：722.56g/mol
Ex/Em：336/503 nm
溶解性：溶于DMSO
狀態(tài)：黃色固體
純度：≥95%
儲存條件：-20℃避光干燥
化學(xué)結(jié)構(gòu)式：
【使用方法】
儲存液制備
取一管低溫保存的Mag-Fura-2 AM,，置于室溫回溫20min。之后加入無水DMSO配制成1~5mM儲存液，比如50μgMag-Fura-2 AM溶于13.8μl DMSO，溶解后即得到5mM儲存液。
注意：未使用的儲存液分裝儲存在-20℃，避免反復(fù)凍融，且要避光保存。盡快使用完。
【操作步驟】
（1）在所需溫度（25℃~37℃）預(yù)孵育細(xì)胞10min，使其離子梯度達(dá)到穩(wěn)定和平衡。
（2）取4μl Mag-Fura-2 AM儲存液和5μl 20% Pluronic®F-127，加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)液，劇烈漩渦混勻得到均勻的探針分散液。
（3） 取250μl上述制備的探針分散液加入750μl含細(xì)胞的培養(yǎng)基內(nèi)混勻，此時(shí)得到終濃度為1~5μM的工作液，根據(jù)起始母液濃度來確定。
（4）根據(jù)需求探針孵育15~60min。
（5）細(xì)胞清洗3次，之后繼續(xù)孵育30min以保證細(xì)胞內(nèi)的探針去酯化。之后選擇儀器進(jìn)行熒光測定。
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本試劑僅供科研使用！
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