| 參考價 | ￥288.00 |
| 規(guī)格 | 500T | 288元 | 1 個可售 |
產品簡介
| 產地 | 國產 | 級別 | 其他 |
| 產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
| BCA Protein Assay Kit (BCA蛋白濃度測定試劑盒) | HRX0119 | 500T | 288 |
| BCA Protein Assay Kit (BCA蛋白濃度測定試劑盒) | HRX0120 | 2500T | 818 |
產品描述
本產品是一種即用型的總蛋白濃度測定試劑盒，由一系列確定濃度的蛋白質標準溶液組成。BCA試劑盒可通過測量562nm處的吸光度并與蛋白標準物的吸光度-濃度曲線進行比較，快速測定總蛋白濃度。蛋白質定量過程可以在45分鐘內完成。
該產品基于BCA (Bicin -choninic Acid) 法研制而成，實現了對蛋白質進行快速、穩(wěn)定、靈敏的濃度測定。其原理是在堿性環(huán)境下蛋白質分子中的肽鏈結構能與Cu2+絡合生成絡合物。同時將Cu2+還原成Cu+。該測定法的紫色反應產物是由兩個BCA分子與一個亞銅離子螯合形成的。 這種水溶性復合物在562nm處表現出很強的吸光度，在較寬的工作范圍 (20-2,000μg/ ml) 中， 隨著蛋白質濃度的增加，吸光度幾乎呈線性。
BCA方法不是真正的端點方法，也就是說最終顏色會繼續(xù)變化。但是孵育后顏色變化的速度足夠慢可以允許分析大量的樣品。據報道蛋白質的大分子結構，肽鍵的數量以及四種特定氨基酸 (半g氨酸、g氨酸、s氨酸和l氨酸) 的存在與BCA的顏色形成有關。對二肽、三肽和四肽的研究表明顏色形成的程度不僅僅是由單個產生顏色的官能團的總和引起的。
因此通常參考諸如牛血清白蛋白 (BSA) 的常見蛋白質的標準來確定待測蛋白質濃度。一系列確定濃度的蛋白質標準溶液與待測物一起進行測定，然后根據標準曲線確定每個待測物的濃度。如果需要精確定量待測蛋白質，建議選擇質量與待測蛋白質相似的蛋白質標準品。例如在測定免疫球蛋白樣品時，可以使用牛γ球蛋白 (BGG) 標準品。在介紹的兩種檢測法中，其中試管檢測法需要更大體積 (0.1mL) 的蛋白質樣品，但是由于它使用的樣品與工作試劑之比為1:20 (v / v)，因此干擾物質的影響降至低。
產品特性
| 組分 | 500 tests | 2500 tests |
| BCA Reagent A | 100 mL | 500 mL |
| BCA Reagent B | 3 mL | 5 mL × 3 |
| BSA 標準品①（0 μg/mL） | 1 mL | 1 mL × 5 |
| BSA 標準品②（25 μg/mL） | 1 mL | 1 mL × 5 |
| BSA 標準品③（125 μg/mL） | 1 mL | 1 mL × 5 |
| BSA 標準品④（250 μg/mL） | 1 mL | 1 mL × 5 |
| BSA 標準品⑤（500 μg/mL） | 1 mL | 1 mL × 5 |
| BSA 標準品⑥（750 μg/mL） | 1 mL | 1 mL × 5 |
| BSA 標準品⑦（1000 μg/mL） | 1 mL | 1 mL × 5 |
| BSA 標準品⑧（1500 μg/mL） | 1 mL | 1 mL × 5 |
| BSA 標準品⑨（2000 μg/mL） | 1 mL | 1 mL × 5 |
A.試管配制
1.以50:1的比例混合BCA試劑A和BCA試劑B。即將50ml BCA試劑A與1ml BCA試劑B混合。
注意: 使用以下公式確定所需工作試劑的總量： (標準品+待測樣品) x (重復次數) x (每個樣品所需要的BCA工作液) =所需BCA工作液總體積。
2.將100μL每種標準品和待測蛋白質分別添加到單獨的標記好的試管中，如表1。
表1：白蛋白(BSA)標準品
| 孔編號 | A | B | C | D | E | F | G | H | I |
| 添加物 | 標準品① | 標準品② | 標準品③ | 標準品④ | 標準品⑤ | 標準品⑥ | 標準品⑦ | 標準品⑧ | 標準品⑨ |
| 體積（μL） | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| BSA終濃度（μg/mL） | 0 | 25 | 125 | 250 | 500 | 750 | 1000 | 1500 | 2000 |
3.在每個試管中加入2 ml BCA工作試劑并充分混合。
4.在37°C下孵育30分鐘。
注意：增加孵育時間和溫度會增加每次測試的凈562 nm吸光度, 并同時降低試劑盒的低檢測水平和試范圍.
5.將所有管子冷卻到室溫(RT)。
6.將分光光度計的波長設置為OD 562nm。用水將儀器校準為零。隨后在10分鐘內測量所有樣品的吸光度。
注意: 即使冷卻至室溫后，色彩仍會繼續(xù)顯影。但是，如果所有吸光度測量均在10分鐘內進行，則隨后在RT處的顯影太弱而不會產生明顯的誤差。
7.從所有讀數中減去空白的OD562。
8.繪制BSA標準曲線: OD562 (Y軸) vs BSA標準濃度 (X軸)。 使用標準曲線確定每個待測樣品的蛋白質濃度。
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