脫氫表雄酮(DHEA)是人體一種內(nèi)源類固醇激素(Anabolic steroids)也有合成藥劑，是運(yùn)動(dòng)興奮禁用物質(zhì)檢測(cè)的熱點(diǎn)。

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：脫氫異雄酮檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名稱：DHEA ELISA

【產(chǎn)品規(guī)格】

96T

【預(yù)期用途】

此脫氫表雄酮(DHEA)定量檢測(cè)試劑盒是酶免法，可用于人血清中脫氫異雄酮的體外定量檢測(cè)。

【前言簡介】

脫氫異雄酮是19C的類固醇激素，由腎上腺皮質(zhì)產(chǎn)生，極少量的由性腺產(chǎn)生。DHEA是睪酮和雌激素合成的前體，由于17-oxo的存在，脫氫異雄酮與雄性激素活性有關(guān)聯(lián)，只有10%的睪酮是由其產(chǎn)生的，然而在新生兒和成年婦女體內(nèi)，脫氫異雄酮含量比睪酮高出數(shù)倍，周邊組織也迅速合成雄性激素（雄烯二酮和睪酮），還有可能會(huì)產(chǎn)生雌性激素。而且脫氫異雄酮與性激素和球蛋白的連接有關(guān)系，這些因素都可能增加DHEA的生物效能。

脫氫異雄酮的生理方面的作用還沒有確切的定義，在體內(nèi)的影響包括，對(duì)細(xì)胞增殖的影響和細(xì)胞新陳代謝的影響。同時(shí)也有研究提到DHEA可能對(duì)膽DAN固醇，脂代謝，胰島素敏感度，分泌和免疫功能有影響。在精神分裂癥和肥胖癥患者體內(nèi)的DHEA水平時(shí)不正常的。DHEA治療已提出一些情況，包括肥胖癥和心血管疾病。

【檢測(cè)原理】

此脫氫表雄酮(DHEA)定量檢測(cè)試劑盒是酶免法中的競爭法原理。微孔板上包被有多克隆抗體。樣品中的內(nèi)源性抗原和酶標(biāo)抗原競爭結(jié)合包被在微孔中的抗原的結(jié)合位點(diǎn)。溫育之后，清洗微孔以終止反應(yīng)。加入底物液后，顏色強(qiáng)度與樣品中的抗原的量成反比。

【試劑盒組成成分】

微孔板          1×12×8     

包被有抗DHEA抗體（多克隆）

標(biāo)準(zhǔn)品          6×1ml       

即用； 0、0.37、1.1、3.3、10、30 ng/ml

質(zhì)控品          2×1ml

即用型、具體濃度見質(zhì)控單               

酶聯(lián)物          1×13mL    

含辣根過氧化物酶標(biāo)記的DHEA，防腐劑

底物液          1×15mL     

即用型、內(nèi)含TMB

終止液          1×15mL  

含1M硫酸，避免接觸終止液，會(huì)刺激和灼傷皮膚

洗滌液          1×100mL  

10倍濃縮

所需材料（未提供）

1) 移液器    體積：50；100；200μL

2) 計(jì)時(shí)器

3) 酶標(biāo)儀

4) 雙蒸水或去離子水

5) 線性-對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙或數(shù)據(jù)處理軟件

【儲(chǔ)存條件】

試劑盒必須儲(chǔ)存于2-8°C的環(huán)境中，可至有效期，不要使用過期的試劑。開封微孔板用包裝袋密封保存在2-8°C環(huán)境下時(shí)，可保存8周

【樣品要求】

實(shí)驗(yàn)需使用血清樣本

不要使用脂血、溶血、黃疸血的樣本

含疊DAN化鈉的樣本不能用于檢測(cè)

樣本采集

采用靜脈穿刺采集血液樣本，允許血液凝集，通過離心分離血清。

樣本儲(chǔ)存

2~8℃下可保存24小時(shí)。要保存更長時(shí)間需保存在-20℃環(huán)境下（12個(gè)月）

樣品稀釋

樣本濃度高于最高標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，需使用零標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)一步稀釋，計(jì)算時(shí)乘以稀釋因子。稀釋方法如下：

A  1：10    10ul血清樣品+90ul 零標(biāo)準(zhǔn)品（充分混合）

B  1：100   10ul稀釋液A +90ul零標(biāo)準(zhǔn)品（充分混合）

 【檢測(cè)方法】

試劑準(zhǔn)備

洗滌液：用900ml蒸餾水將100ml洗滌濃縮液稀釋成1000ml最終體積。室溫下2周穩(wěn)定。

檢測(cè)步驟

1) 將所需數(shù)量的板條置于板架上

2) 將20μL標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品分別加入到微孔板相應(yīng)的微孔中。

3) 在每一微孔中加入100μL酶聯(lián)物，充分混合10秒，在這一步驟中充分混合非常重要

4) 室溫下溫育60分鐘

5) 倒去孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔加入250μL洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干

6) 每孔加入100μL的底物液

7) 室溫下溫育15分鐘

8) 每孔加入100μL終止液終止反應(yīng)

9) 15min之內(nèi)用酶標(biāo)儀檢測(cè)。

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