巴貝斯原蟲IgG檢測試劑盒（間接免疫熒光法IFA）

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：巴貝斯原蟲IgG試劑盒（間接免疫熒光法）

英文名稱：Babesia microti IFA IgG Antibody Kit

【產(chǎn)品規(guī)格】

120T

【預(yù)期用途】

可用于檢測人血清、血漿中抗巴貝斯原蟲IgG抗體。

【前言簡介】

北美的巴貝斯蟲病是由巴貝斯原蟲所引起的。它主要是通過受感染的壁虱叮咬進(jìn)行傳播并且人們一般認(rèn)為，它可以與人粒細(xì)胞埃立克體（HGE）以及/或伯氏疏螺旋體協(xié)同傳播。在以往，巴貝斯蟲病的診斷是通過將外周血進(jìn)行涂片處理，觀察紅細(xì)胞內(nèi)含物的形態(tài)特征。試劑盒采用了被巴貝斯蟲感染的倉鼠或者小鼠紅細(xì)胞作為檢測特異性抗體的抗原。

【檢測原理】

巴貝斯原蟲IgG檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)實(shí)施時(shí)，病人血清使用緩沖液稀釋后加入到單獨(dú)的孔中進(jìn)行溫育，使血清中的抗體與孔中抗原相結(jié)合。洗滌一次以洗去未反應(yīng)的血清蛋白，然后加入熒光標(biāo)記的抗人IgG抗體。再次洗滌洗去未結(jié)合的標(biāo)記物。之后通過熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。陽性結(jié)果可以觀察到紅細(xì)胞內(nèi)邊界清晰的蘋果綠熒光顯色的包含物。陽性結(jié)果隨后繼續(xù)檢測以得出最高的滴度。

【試劑盒組成成分】

檢測玻片     10片

每片12個孔,含特異性抗原。

熒光標(biāo)記物   2.5ml

黃蓋滴瓶，含熒光標(biāo)記的抗人IgG，BSA。

陽性質(zhì)控     0.5ml

藍(lán)蓋滴瓶，含陽性人血清，滴度1:64，終點(diǎn)滴度1:512。

陰性質(zhì)控     0.5ml

紅蓋滴瓶，含陰性人血清，滴度1:50。

封固劑       1ml

白蓋滴瓶，含50%甘油的PBS。

洗滌液       1L

將所提供的洗滌液加入到1L純化水中，得最終PH7.2。

所需材料（未提供）

1. 蒸餾水

2. 250或者500ml洗瓶

3. 稀釋用試管

4. 移液器

5. 24×50mm蓋玻片

6. 熒光顯微鏡

7. 37℃溫育器

8. 濕盒

【儲存條件及有效期】

2-8℃下保存，效期內(nèi)有效。

【樣本要求】

允許全血樣品凝集，通過離心分離出血清樣本。2-8℃下可保存5天，要保存更長時(shí)間需儲存在-20℃環(huán)境下。

【檢測方法】

1. 疑似的人樣本用PBS按1:64進(jìn)行預(yù)稀釋。

2. 按需要稀釋陽性質(zhì)控。（注：所提供的陽性質(zhì)控已經(jīng)1:64稀釋過）。

3. 對應(yīng)孔中加入10ul稀釋好的病人樣品，陰性質(zhì)控以及稀釋好的陽性質(zhì)控。

4. 將玻片放入濕盒中，37℃下溫育30分鐘。

5. 將玻片取出，使用洗滌劑洗滌3次，不要讓孔中變干。

6. 每孔加入1滴（10ul）的熒光標(biāo)記物，放回到濕盒中，37℃下避光溫育30分鐘。

7. 重復(fù)步驟5。

8. 玻片上滴加2-3滴封固劑，蓋上蓋玻片。

9. 使用熒光顯微鏡在400× 視野下，觀察玻片。玻片可在2-8℃下避光保存24小時(shí)。

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