島津LC-20A液相色譜儀操作規(guī)程
1、開關(guān)機(jī)順序
開機(jī)順序:先打開泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、檢測(cè)器電源開關(guān),再打開系統(tǒng)控制器電源開關(guān),點(diǎn)擊電腦中LC-Solution工作站聯(lián)機(jī),聯(lián)上后能聽到一聲蜂鳴。
關(guān)機(jī)順序:與開機(jī)順序相反,即先關(guān)閉LC-Solution工作站-系統(tǒng)控制器-泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、檢測(cè)器。
2、流動(dòng)相及樣品的準(zhǔn)備
流動(dòng)相配制所用的試劑必須是色譜級(jí)。流動(dòng)相須經(jīng)0.45um 的微孔濾膜過(guò)濾后方能進(jìn)入LC系統(tǒng)。水和有機(jī)相所用的微孔濾膜不同,有機(jī)相(如甲醇)的過(guò)濾用F膜,水用水膜。
樣品溶液亦必須用0.45um 的微孔濾膜過(guò)濾后才能進(jìn)樣。
3、工作站的進(jìn)入及系統(tǒng)的開啟
雙擊桌面上的“labsolution”圖標(biāo),選擇“operation”項(xiàng)并單擊,在彈出窗口后按OK進(jìn)入工作站。
首先打開儀器上的排空閥(open方向旋轉(zhuǎn)180度)。然后點(diǎn)擊儀器面板上“purge”鈕開始清洗5個(gè)流路3分鐘,自動(dòng)進(jìn)樣器25分鐘,然后在分析參數(shù)設(shè)置頁(yè)中設(shè)置流速,檢測(cè)波長(zhǎng),柱溫,停止時(shí)間等。在完成后點(diǎn)擊“Download”將分析參數(shù)傳輸至主機(jī)。
分析方法的保存:選擇file-save method file as-選擇保存路徑-取名保存文件
系統(tǒng)的啟動(dòng):點(diǎn)擊“instrument on/off”鍵開啟系統(tǒng)(此時(shí)泵開始工作、柱溫箱開始升溫。
4、進(jìn)樣準(zhǔn)備
將樣品瓶放入自動(dòng)進(jìn)樣器中
觀察基線及柱壓,待基線平直(-5~30mv),壓力穩(wěn)定(0.5Mpa)時(shí)方可進(jìn)樣。
5.進(jìn)樣
點(diǎn)擊助手欄中的“single start”鍵,彈出對(duì)話框,在對(duì)話框中輸入“sample name”“method”“data file”等。然后填入進(jìn)樣瓶號(hào)(vial),架號(hào)(tray),進(jìn)樣體積(injection volumn)。
填完后點(diǎn)擊“start”,儀器開始自動(dòng)進(jìn)樣分析。
6.數(shù)據(jù)文件的調(diào)用及查看
點(diǎn)擊助手欄中的“Postrun analysis”鍵,打開數(shù)據(jù)處理窗口。
打開文件搜索器,定位至數(shù)據(jù)文件所在文件夾,選擇文件的類型,雙擊文件名即可打開數(shù)據(jù)文件(此時(shí)可以查看峰面積、保留時(shí)間等參數(shù))。
7.數(shù)據(jù)文件中圖譜及數(shù)據(jù)的打印
報(bào)告模板的制作:在助手欄中選擇“report format”鍵,出現(xiàn)空白頁(yè)后,點(diǎn)擊sample information、LC/PDA Chromatogram、LC/PDA Peak Table等快捷按鈕,在空白頁(yè)中拖曳鼠標(biāo),即可依次加入相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)信息。
報(bào)告模板的保存:File-save report format file as-桌面lcsolution-templates
數(shù)據(jù)文件的打?。涸谖募阉髌髦羞x擇欲打印的數(shù)據(jù)文件,拖曳至報(bào)告模板中,然后點(diǎn)擊助手欄中的打印按鈕即可。
8.液相維護(hù)須知
流動(dòng)相及樣品必須用0.45um的濾膜過(guò)濾(水相用水膜,有機(jī)相用有機(jī)膜)。
RINSE液可以用甲醇。A、B流路在使用前必須purge 3min以排氣泡。
自動(dòng)進(jìn)樣器在每次使用前必須purge 25min以保證進(jìn)樣精度。
柱子在進(jìn)樣前必須用流動(dòng)相充分平衡,一般40min 左右。待基線及柱壓穩(wěn)定后方可進(jìn)樣。
柱子在每天分析結(jié)束后必須用甲醇沖洗干凈(一般30min)。如果流動(dòng)相中含有鹽、酸等成分,則沖洗柱子的程序?yàn)椋核?0min)-甲醇(30min)
清洗瓶中的水應(yīng)每天更換,加入10%的異丙醇。
9.Instrument2010和intrumentRF-10AxL同時(shí)使用時(shí)的操作規(guī)程
同時(shí)打開instrument1和intrument2
在intrument1中設(shè)置流速、Bconc、柱溫、stoptime等參數(shù),并保存方法。Download參數(shù)后打開系統(tǒng)(按instrument on/off)。此時(shí)D2燈可以關(guān)閉。
在intrument2中設(shè)置有關(guān)熒光檢測(cè)的參數(shù),激發(fā)波長(zhǎng)、發(fā)射波長(zhǎng)、stoptime,并保存方法。Download參數(shù)后打開系統(tǒng)(按instrument on/off)。
點(diǎn)擊instrument2的助手欄中的“single start”, 填寫相關(guān)信息后點(diǎn)擊start鍵進(jìn)入采樣準(zhǔn)備狀態(tài)。(會(huì)出現(xiàn)一個(gè)小窗口,此時(shí)不用理會(huì),繼續(xù)instrument1的設(shè)置)
點(diǎn)擊instrument1的助手欄中的“single start”, 填寫相關(guān)信息后點(diǎn)擊start鍵開始采樣。此時(shí),instrument1的進(jìn)樣系統(tǒng)會(huì)發(fā)送一個(gè)“start”信號(hào)給instrument2,使instrument2由采樣準(zhǔn)備狀態(tài)轉(zhuǎn)為采樣狀態(tài)。
說(shuō)明:×2項(xiàng)中的stoptime應(yīng)比3項(xiàng)中的stoptime大0.2min
Rheodyne操作說(shuō)明
型號(hào)7725i,9725i,3725i-038,3725i,和9125手動(dòng)進(jìn)樣器
1.描述
型號(hào)7725i,9725i,3725i-038,3725i,和9125 是樣品通過(guò)閥前面的內(nèi)嵌式針道被載入的六通閥。型號(hào)7725i和3725i-038是不銹鋼的,9125是PEEK制成的。
型號(hào)3725i-038和3725i是接收1/8``量的準(zhǔn)備階段的進(jìn)樣器。除了進(jìn)行準(zhǔn)備階段的應(yīng)用之外,準(zhǔn)備階段的進(jìn)樣器和它們相應(yīng)的分析階段的進(jìn)樣器是一樣的。
帶有“i”的型號(hào)包含一個(gè)內(nèi)嵌的側(cè)向開關(guān)。側(cè)向開關(guān)的具體說(shuō)明參照10.3。
圖1說(shuō)明了閥的流程圖(型號(hào)9125不包含文中提到的MBB閥)。這些周期在閥的定子中循環(huán)。深色槽是轉(zhuǎn)子密封墊的連接部分。流動(dòng)通道體現(xiàn)了MBB閥的設(shè)計(jì)。MBB閥的具體的剖面圖如圖2所示。
樣品環(huán)在載入位置通過(guò)針道被裝載。轉(zhuǎn)動(dòng)手柄60度,閥從LOAD檔開到INJECT檔。在INJECT檔,流動(dòng)相和樣品通過(guò)環(huán)到達(dá)柱的頂端。MBB閥從LOAD檔開到INJECT檔過(guò)程中,閥結(jié)構(gòu)允許連續(xù)的流動(dòng)。流動(dòng)相從轉(zhuǎn)子密封槽和MBB槽通道中連續(xù)的流動(dòng)直到轉(zhuǎn)動(dòng)停止



型號(hào)7725i和型號(hào)9725i各有一個(gè)2微升內(nèi)部進(jìn)樣環(huán)(P/N7755-015)。內(nèi)部樣品環(huán)可在進(jìn)樣器內(nèi)部安裝,來(lái)代替標(biāo)準(zhǔn)定子的外部正面配件。
2.閥的裝配
裝在單獨(dú)包裝里的閥的裝配由下文列出。型號(hào)7725i,型號(hào)9725i和型號(hào)9125配有標(biāo)準(zhǔn)的20微升樣品環(huán)。型號(hào)3725i-038和型號(hào)3725i 配有標(biāo)準(zhǔn)的10微升樣品環(huán)。
1/4-5/16扳手(僅3725i-038和3725i配有)
9/64內(nèi)六角扳手
5/64內(nèi)六角扳手
針道清洗器
固定螺絲
排氣管
對(duì)于型號(hào)7725i,9725i和9125,閥的22#標(biāo)準(zhǔn)針應(yīng)在使用進(jìn)樣器之前從針道里移出。型號(hào)3725i-038和3725i 配有16#標(biāo)準(zhǔn)針和針道插塞。當(dāng)載入進(jìn)樣器時(shí),插塞應(yīng)從針道中移出。
3.0 規(guī)格明細(xì)
表1. 閥的規(guī)格
| 閥 | 溫度(OC) | 壓力[兆帕(巴,每平方米磅數(shù))] | 流動(dòng)通道直徑 [毫米(英寸)] | 表面 |
| 7725i | 80 | 48(483,7000) | 0.6(0.024)&0.5(0.018) | 316不銹鋼,氧化鋁陶瓷和惰性聚合物 |
| 9725i | 50 | 34(345,5000) | 0.3(0.013)&0.5(0.018) | PEEK,氧化鋁陶瓷和惰性聚合物 |
| 3725i-038 | 50 | 34(345,5000) | 1.0(0.040) | 316不銹鋼. PEEK |
| 3725i | 50 | 28(276,4000) | 1.0(0.040) | PEEK |
| 9125 | 50 | 48(483,7000) | 0.3(0.013)&0.5(0.018) | PEEK氧化鋁陶瓷. 惰性聚合物 |
4. 重要安全事項(xiàng) (1). 警告(只對(duì)于3725i-038和3725i型號(hào)):當(dāng)使用手動(dòng)裝置附屬的針道塞時(shí),請(qǐng)避開閥從INJECT檔到LOAD檔時(shí)從針道中出來(lái)的流動(dòng)相。

(2).警告(只對(duì)于7725i,9725i和9125型號(hào)):當(dāng)使用大于100微升的進(jìn)樣環(huán)時(shí),請(qǐng)避開閥從INJECT檔到LOAD檔時(shí)從針道中出來(lái)的流動(dòng)相。例如:當(dāng)從19MP減壓時(shí),1毫升樣品環(huán)會(huì)噴射出20微升。
(3).警告:使用針道清洗器時(shí),請(qǐng)緩慢抽空注射器,以免溶劑從后面噴射出來(lái)。
(4).注意:使用PEEK閥時(shí),請(qǐng)使用定子中的RheFlex PEEK的配件。金屬套圈會(huì)引起對(duì)塑料定子的不可修復(fù)的損壞。
(5).注意:在進(jìn)行減震操作來(lái)防止晶體成形后用水沖洗閥會(huì)引起對(duì)轉(zhuǎn)子密封墊的損傷。
(6).注意:由于30度的位置,型號(hào)7725和7725i的進(jìn)樣環(huán)和Rheodyne許多其他型號(hào)的不銹鋼環(huán)是不能互換的。
5.0正確使用注射器對(duì)于型號(hào)7725i,9725i和9125,使用22#標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格注射針頭,不用電子微光,要使用90度規(guī)格(square cut?). 對(duì)于型號(hào)3725i-038和3725i,使用16#標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格注射針頭,不用電子微光,要使用90度規(guī)格(square cut?). 使用不正確型號(hào)的針頭會(huì)損壞進(jìn)樣器。
6.安裝
a)把閥裝在嵌板上,擰松兩個(gè)手動(dòng)螺絲移走手柄。擰緊配好的兩個(gè)螺絲把閥固定到嵌板上。
b) 確保手柄突出物在壓力調(diào)節(jié)螺絲之外。擰緊軸兩側(cè)平坦部分的兩個(gè)設(shè)定螺絲來(lái)更換手柄。
c) 詳見注意4.4。連接通道5和6的兩個(gè)排氣管,放置兩個(gè)排氣口的末端于同一水平高度,來(lái)防止針道虹吸。
d) 把泵與通道2連接,把柱線與通道3連接。開始注射時(shí),把柱和閥分開。
7.沖洗進(jìn)樣器在進(jìn)樣中,用1毫升流動(dòng)相沖洗針道,使用圖5所示的針道清洗器。這時(shí),用泵沖洗樣品環(huán)。
注意:為了避免液體從后面噴射出來(lái),要緩慢的注射。
8.0注射
有兩種常見的載入樣品環(huán)的方法—或部分填充。第三種方法是由吸力載入,(章節(jié)8.3)這是想避免和金屬接觸時(shí)載入PEEK閥的方法。
8.1填充環(huán)
在填充環(huán)中,注射樣品的量由環(huán)的體積決定(包括閥通道)。這種方法的精度。
填入樣品環(huán)至少二至五倍的樣品量。六至十倍的樣品量將得到更好的精度。樣品需要過(guò)量是因?yàn)橘N近環(huán)壁的流動(dòng)相會(huì)由于圖6所示的流體黏度效應(yīng)而緩慢損失掉。
填充環(huán)的步驟:
a)參見警告4.2 然后調(diào)至LOAD檔。
b)把注射器插入到針道中。通過(guò)密封墊的最后2-3毫米可能會(huì)感覺到緊然后在接觸到定子的位置停下。
c)載入樣品。
d)將注射器留在里面然后調(diào)至INJECT檔。
e)(僅對(duì)于型號(hào)3725i-038和3725i)將閥由INJECT檔調(diào)至LOAD檔時(shí),為防止流動(dòng)相濺射,要移開注射器,在回到LOAD檔之前把手柄旁的塞子放進(jìn)針道內(nèi)。
8.2 部分填充環(huán)
如果你只有少量的樣品,請(qǐng)選擇此方法。在部分填充環(huán)方法中,進(jìn)樣量由注射器決定。此方法中樣品環(huán)中樣品量不應(yīng)多于環(huán)體積的一半。例如,在20微升環(huán)中加不多于10微升的樣品。樣品量若超過(guò)一半,一些樣品會(huì)叢孔6中流失。這是由于層流液體黏度的影響,樣品在環(huán)中心以相對(duì)于環(huán)壁二倍的速率流下,如圖6所示。
部分填充環(huán)的步驟:
a) 在INJECT檔中,拿針道清洗器用1毫升的流動(dòng)相去沖洗針道,可以在注射前沖洗掉污染物。沖洗的液體從孔5種流出。
b)按照章節(jié)8.1中a-e步驟操作。
8.3 吸入載入
兩種過(guò)程方法都會(huì)使樣品與載入注射器的金屬針頭相接觸。使用一個(gè)注射器來(lái)吸入環(huán)里的樣品可以避免其與金屬的接觸。操作方法如下:
a) 在LOAD狀態(tài),把連接到端口6的管子浸入到樣品溶液中。
b) 把空進(jìn)樣器插入針孔中,然后把樣品吸入到定量環(huán)。另一種方法,使用Suction Needle Adapter(P/N 9125-076,不提供)。使用方法見圖7。
c) 旋轉(zhuǎn)把手至INJECT狀態(tài)。

如果進(jìn)樣器吸入大量的樣品,進(jìn)樣器的金屬部分會(huì)合樣品接觸,但是這些樣品在定量環(huán)的外部不能注射到定量環(huán)內(nèi)。這種進(jìn)樣器在排可以多次使用。
注入任何可操作的樣品時(shí),定量環(huán)體積至少是樣品量的四倍。進(jìn)樣前,首先吸入流動(dòng)相清洗定量環(huán),然后吸入樣品,再吸入流動(dòng)相?,F(xiàn)在樣品就在兩段流動(dòng)相之間。
9.0 處理漏夜和壓力過(guò)高
在閥把手的末尾有一個(gè)壓力調(diào)節(jié)螺母。設(shè)計(jì)這個(gè)把手就是為了便于調(diào)節(jié)該螺母。如果你需要高壓操作或者在定子環(huán)之間有漏夜現(xiàn)象,松開這兩個(gè)固定螺母,這樣把手就會(huì)從軸上滑落,兩個(gè)突出部分剛好與調(diào)節(jié)螺母的狹縫相吻合。把此螺母旋轉(zhuǎn)1/20周即可。如果還漏,再重復(fù)上述操作。若還不行,更換轉(zhuǎn)子密封。
注意:當(dāng)閥不在一個(gè)平面上時(shí),調(diào)解螺絲很難擰動(dòng),在這種情況下,調(diào)解前先把三個(gè)定子螺絲旋松1/4圈。再擰緊定子螺絲,檢查是否漏夜。
換把手,擰緊軸體上兩個(gè)平面的固定螺母。旋緊固定螺絲前,應(yīng)先確保把手的突出部分位于調(diào)節(jié)螺絲的狹縫外部。這一步非常重要。如果把手和壓力調(diào)解螺絲嚙合, LOAD和INJECT之間的轉(zhuǎn)換就不能正常進(jìn)行。見圖9。

注意:如果排空端口5和6沒有和進(jìn)樣口在同一水平線,會(huì)導(dǎo)致虹吸,這經(jīng)常被誤認(rèn)為是漏液。當(dāng)排空管和進(jìn)樣口都排空時(shí),這種泄露就會(huì)停止。但是如果泄露是由于轉(zhuǎn)子密封損害引起的,這是就仍有泄露。
10.0 維護(hù)
最終需要更換的部件只有轉(zhuǎn)子密封和定子。
過(guò)早損壞的原因主要是:
a) 尖頭針能損壞定子表面,進(jìn)而引起轉(zhuǎn)子密封表面的深度劃痕。
b) 樣品中的不溶物可以劃傷轉(zhuǎn)子密封表面。
原裝的Rheodyne 很容易更換,方法如下:
10.1 拆卸
拆卸閥時(shí),參照?qǐng)D8,按如下操作:
a) 滑動(dòng)新的隔離膜(打開朝向轉(zhuǎn)子密封的一面)到支撐環(huán)附近的軸的定子末端。
b) 如圖10所示,直線排列轉(zhuǎn)子密封。轉(zhuǎn)子密封狹縫朝向定子方向。
c) 更換定子環(huán),這樣600中止環(huán)的栓就可以進(jìn)入定子環(huán)中相配合的孔。
d) 在定子上安裝定子表面裝置。裝置中的三個(gè)栓只能以一個(gè)方向機(jī)插入向配合的孔。
e) 更換閥上的定子和定子表面裝置。使定子環(huán)中的栓插入定子中相配合的孔。
f) 加上三個(gè)定子螺絲。每個(gè)螺絲都在手感到緊后再擰緊半圈。
g) 更換把手,擰緊軸的兩個(gè)面上的那兩個(gè)固定螺絲。擰緊固定螺絲前確保把手突出部分在軸體的狹縫外。這一步很重要。如果把手惡化壓力調(diào)節(jié)螺絲嚙合,軸就不能再LOAD和INJECT狀態(tài)之間旋轉(zhuǎn)。見圖9。

10.3 位置感受開關(guān)
7725i,9725i,3725i-038和3725i型號(hào)的位置感應(yīng)開關(guān)都是標(biāo)準(zhǔn)型號(hào)的。它是磁力簧片開關(guān),由密封在軸內(nèi)的磁鐵開啟。開關(guān)位于INJECT位置附近。開關(guān)的規(guī)格是100V,200mA。
要更換或移除開關(guān),按以下操作:
a) 移去定子,定子環(huán)和中止環(huán)。
b) 把開關(guān)從中止環(huán)中拉出來(lái)。
c) 更換新開關(guān)。
d) 按照10.2節(jié)的步驟重新組裝。
11.0 操作建議和故障排除
11.1 漏液
如果在定子和定子環(huán)之間或針頭處以及排空管到處有漏液現(xiàn)象,擰緊壓力調(diào)節(jié)螺絲,原因已在9.0 節(jié)中有敘述。如果仍有漏液,那么更換轉(zhuǎn)子密封或定子。
用戶評(píng)論
發(fā)布評(píng)論