? 靈敏 — 準(zhǔn)確檢測(cè)低至 5 µg/mL（熒光法）或 25 µg/mL（比色法）的肽混合物
? 可重現(xiàn) — 檢測(cè)試劑盒的性能已使用肽消化混合物進(jìn)行嚴(yán)格檢測(cè)
? 可靠的肽消化標(biāo)準(zhǔn)品 — 試劑盒包括一種經(jīng)驗(yàn)證的肽消化標(biāo)準(zhǔn)品，可提高定量的可重現(xiàn)性
? 兼容 — 可與多種試劑配合使用，包括 MS 樣品制備試劑和 TMT 標(biāo)記肽（熒光測(cè)定）
? 方便 — 簡(jiǎn)單的混合讀取形式，在短短5分鐘（熒光法）或15分鐘（比色法）內(nèi)便可讀到穩(wěn)定信號(hào)

Pierce 定量比色肽檢測(cè)試劑盒提供了改良的 BCA 試劑（用于將 Cu+2 還原為 Cu+1）、經(jīng)優(yōu)化的專(zhuān)有螯合劑（用于定量肽混合物）以及肽消化參考標(biāo)準(zhǔn)品（用于生成對(duì)照線性標(biāo)準(zhǔn)曲線）。這款比色肽檢測(cè)試劑盒只需少量樣品 (20 µL)，且工作肽濃度范圍為 25–1000 μg/mL。在反應(yīng)中，先在堿性條件下通過(guò)肽的酰胺主鏈還原銅（雙縮脲反應(yīng)），隨后，還原的銅與螯合物結(jié)合形成明亮的紅色復(fù)合物（吸收波長(zhǎng)為 480 nm），在短短15分鐘內(nèi)便可讀取到該復(fù)合物。該反應(yīng)產(chǎn)生的信號(hào)比用于肽分析的 Micro-BCA 蛋白檢測(cè)試劑盒靈敏 3–4 倍。比色肽檢測(cè)試劑盒與 TMT 標(biāo)記肽兼容，但不建議用于合成肽，因?yàn)樵摍z測(cè)試劑盒會(huì)受到肽氨基酸含量的影響。

Pierce 定量熒光肽檢測(cè)試劑盒的試劑包括肽測(cè)定緩沖液、熒光肽標(biāo)記試劑以及用于肽濃度定量測(cè)定的肽消化測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品。這款靈敏的檢測(cè)試劑盒僅需 10 µL 樣品，會(huì)隨著肽濃度增加 (5–1000 μg/mL) 而產(chǎn)生線性響應(yīng)，并且可生成在短短5分鐘內(nèi)便能檢測(cè)到的穩(wěn)定最終熒光。在此檢測(cè)試劑盒中，使用胺反應(yīng)性熒光試劑（直到與肽反應(yīng)才會(huì)發(fā)出熒光）在肽的氨基末端添加了特異性標(biāo)記。在微孔板讀數(shù)儀 (ex390/em475) 上檢測(cè)熒光標(biāo)記的肽。該檢測(cè)試劑盒適用于定量測(cè)定肽消化混合物和氨基末端未封閉的合成肽。熒光檢測(cè)試劑盒與 TMT 標(biāo)記肽不兼容。

Thermo Scientific 肽消化測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品旨在用作與 Pierce 定量熒光和比色肽檢測(cè)試劑配合使用的參考標(biāo)準(zhǔn)品，以提高肽定量的可重現(xiàn)性和準(zhǔn)確性。肽消化測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品以濃度為 1 mg/mL 的即用型液體規(guī)格提供。已使用 MS 級(jí)消化參考蛋白，以盡量減少缺失的切割。為確保性能一致，監(jiān)測(cè)蛋白的酶切效率以確保批間一致性，并通過(guò)與參比標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較來(lái)評(píng)估質(zhì)量。

應(yīng)用
? 對(duì)樣品濃度進(jìn)行歸一化，以便用于下游定量應(yīng)用
? 對(duì)上樣量進(jìn)行歸一化，以便用于 LC、MS 和 LC/MS 應(yīng)用
? 在肽純化步驟后測(cè)量回收率