Glycomix™ SAX離子交換色譜柱專(zhuān)為帶多電荷聚糖類(lèi)化合物的分離而設(shè)計(jì)。填料基質(zhì)為窄粒徑分布的親水聚合物顆粒,在聚合物顆粒的親水表面化學(xué)鍵合強(qiáng)陰離子交換基團(tuán)——季銨基。
Glycomix™ SAX 技術(shù)參數(shù)
| 特性 | Glycomix™ SAX |
| 官能團(tuán) | 季銨基 |
| 表面特性 | 親水 |
| pH范圍 | 2 - 12 |
| 4.6×250 mm柱的柱壓 | 0.22 mL/min為10 bar 1 mL/min為38 bar |
| 柱壓 | ~ 1,500 (psi) |
| 鹽濃度范圍 | 20 mM - 2.0 M |
| 溫度 | ~ 80 (°C) |
| 流動(dòng)相兼容性 | 水相和有機(jī)相 |
| 應(yīng)用 | 肝素,帶多電荷聚糖 |
| ● 均勻一致的粒徑確保了高分辨率和分離的高效性
● 高批間重現(xiàn)性
● 寬pH范圍(2-12)
● 從分析級(jí)到制備級(jí)規(guī)模
● 適于肝素和聚糖的分離和分析 |
高批間重現(xiàn)性
由于嚴(yán)格控制的表面化學(xué)和樹(shù)脂生產(chǎn)工藝,Glycomix樹(shù)脂具有高批間重現(xiàn)性,使得色譜柱性能非常穩(wěn)定。在的檢測(cè)中,保留時(shí)間的批間分離偏差小于1%,峰面積則小于5%。
圖1. 三個(gè)批次GlycomixTM SAX樹(shù)脂的高批間重現(xiàn)性
| | | 色譜條件 | | | Column: | GlycomixTM SAX, 4.6×250mm | | phase: | A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0 B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 | | Flow rate: | 0.22 mL/min | | Gradient: | 20% - 90% B in 60 minutes | | Wavelength: | 202 nm | | Temperature: | 25 °C | | Injection volume: | 10 µL | | Pressure: | 9.5 bar | | Sample: | 20 mg/mL 1 mg/mL 硫酸皮膚素 (DS) 1 mg/mL 多 (OSCS) in H2O | |
批間的峰保留時(shí)間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差
| Peak Name | Lot A | Lot B | Lot C | RSD% |
| Chondroitin Sulfate B | 12.286 | 12.300 | 12.434 | 0.41% |
| Heparin | 21.71 | 21.723 | 21.919 | 0.44% |
| OSCS | 33.936 | 33.853 | 34.114 | 0.32% |
色譜柱壽命長(zhǎng)
*的表面化學(xué)結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定的生產(chǎn)工藝使得GlycomixTM SAX具有長(zhǎng)的色譜柱壽命。下圖顯示了同一色譜柱在重復(fù)進(jìn)樣時(shí)的分離性能。該柱展現(xiàn)了穩(wěn)定的分離效率。
圖2. 重復(fù)進(jìn)樣的疊加圖
| | 色譜條件 | | | Column: | GlycomixTM SAX, 4.6×250mm | | Guard Column: | GlycomixTM SAX, 4.6×50mm | | phase: | A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0 B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 | | Flow rate: | 0.22 mL/min | | Gradient: | 20% - 90% B in 60 minutes | | Wavelength: | 202 nm | | Temperature: | 25 °C | | Injection volume: | 10 µL | | Pressure: | 9.5 bar | | Sample: | 20 mg/mL 1 mg/mL 硫酸皮膚素 (DS) 1 mg/mL多 (OSCS) in H2O | |
不同上樣量下的靈敏分離
GlycomixTM SAX能夠從標(biāo)準(zhǔn)品中分離出其他組分。在圖3中,圖A是20 mg/mL Heparin、1mg/mL DS和1 mg/mL OSCS的標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖,圖B是濃度為1 mg/mL的OSCS色譜圖。兩圖相對(duì)比可知,DS和之間的小峰來(lái)自O(shè)SCS標(biāo)準(zhǔn)樣品。色譜條件同圖4。
GlycomixTM SAX可用于及其雜質(zhì)的定量分析。圖4為不同上樣量下的分離譜圖,其中濃度從0.5 mg/ml到10 mg/ml,OSCS的濃度從0.125 mg/ml到4 mg/ml,DS的濃度從0.25 mg/ml到4 mg/ml。在測(cè)試濃度范圍內(nèi),相對(duì)偏差R2值超過(guò)0.99。
圖3. OSCS標(biāo)準(zhǔn)品和摻入DS與OSCS的色譜疊加圖
圖4. 不同進(jìn)樣的色譜疊加圖,其中從0.5mg/mL到10mg/mL, DS從0.125 mg/m到4.0 mg/mL,OSCS從0.25 mg/mL到4.0 mg/mL
| | 色譜條件 | | | Column: | GlycomixTM SAX, 4.6×250mm | | Guard Column: | GlycomixTM SAX, 4.6×50mm | | phase: | A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0 B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 | | Flow rate: | 0.22 mL/min | | Gradient: | 20% - 90% B in 60 minutes | | Wavelength: | 202 nm | | Temperature: | 25 °C | | Injection volume: | 10 µL | | Pressure: | 10 bar | | Sample: | 20 mg/mL 0.2 mg/mL 硫酸皮膚素(DS) 0.2 mg/mL 多 (OSCS) | |
圖5. 硫酸皮膚素(DS)、和多(OSCS)的校準(zhǔn)曲線
色譜柱性能比較
經(jīng)比較, 在的分離上,GlycomixTM SAX優(yōu)于D品牌的柱子。下圖是用GlycomixTM SAX分離的色譜圖,硫酸皮膚素(DS)和之間的分離度為3.8,和多(OSCS)之間的分離度為5.8。美國(guó)藥典(USP)對(duì)于DS/heparin和OSCS/heparin的分離度分別是1.0和1.5。GlycomixTM SAX的分離性能遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于USP規(guī)定的要求。而D品牌色譜柱對(duì)于DS/hepari和heparin/OSCS的分離度分別為1.1和1.8。
圖6. 、硫酸皮膚素和多在GlycomixTM SAX上的分離
| | 色譜條件 | | | Column: | GlycomixTM SAX, 4.6×250mm | | Guard Column: | GlycomixTM SAX, 4.6×50mm | | phase: | A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0 B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 | | Flow rate: | 0.22 mL/min | | Gradient: | 20% - 90% B in 60 minutes | | Wavelength: | 202 nm | | Temperature: | 25 °C | | Injection volume: | 10 µL | | Pressure: | 10 bar | | Sample: | 20 mg/mL 0.2 mg/mL 硫酸皮膚素(DS) 0.2 mg/mL 多 (OSCS) | |
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| 產(chǎn)品 | ID × 長(zhǎng)度 (mm) | 訂貨號(hào) | |
| Glycomix SAX | 4.6 × 250 mm | 901665-4625 | |
| Glycomix SAX保護(hù)柱 | 4.6 × 50 mm | 901665-4605 | |
| Glycomix 方法包 | 色譜柱 + 保護(hù)柱 | 901665-KIT | |
| (Heparin Sodium) | 50 mg | HP-50 | |
| 硫酸皮膚素(Chondroitin Sulfate B) | 5 mg | CS-5 | |
| 多(Oversulfated Chondroitin Sulfate) | 5 mg | OSCS-5 | |
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注:以上為常備規(guī)格訂貨信息,其它規(guī)格或特殊定制產(chǎn)品,電詢(xún)。
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