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腹瀉性貝類(lèi)毒素(DSP)ELISA檢測(cè)試劑盒

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  • 公司名稱(chēng)深圳容金科技有限公司
  • 品       牌
  • 型       號(hào)
  • 所  在  地深圳市
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間2017/6/27 16:08:20
  • 訪問(wèn)次數(shù)4225
產(chǎn)品標(biāo)簽:

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深圳容金科技有限公司是一家產(chǎn)學(xué)研相結(jié)合、科工貿(mào)一體化的,集臨床、食品安全

及動(dòng)物防疫檢驗(yàn)試劑的研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售及技術(shù)服務(wù)為一體的中國(guó)大型生物醫(yī)藥高科技

企業(yè),隸屬于深圳市南山區(qū)*產(chǎn)業(yè)園。公司目前有近 20 余位博士、碩士、留學(xué)

歸國(guó)人員,技術(shù)力量雄厚。

公司自成立以來(lái),不斷加快科技創(chuàng)新和自主品牌建設(shè)步伐,打造企業(yè)核心競(jìng)爭(zhēng)力,

企業(yè)綜合實(shí)力得到快速提升。目前已經(jīng)建成生命科學(xué)研究中涉及的多個(gè)實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái),

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Cytometry、HPLC、免疫組織化學(xué)、免疫熒光、測(cè)序、基因芯片等技術(shù)平臺(tái)。

同時(shí)公司重視營(yíng)造以人為本的企業(yè)文化,著力構(gòu)建和諧企業(yè)。憑著“以質(zhì)量求生存,

以服務(wù)求發(fā)展”的經(jīng)營(yíng)理念和“誠(chéng)信服務(wù)”贏得了廣大友人的厚愛(ài),公司的產(chǎn)品不斷推

陳出新,產(chǎn)品結(jié)構(gòu)也在不斷地調(diào)整優(yōu)化。

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腹瀉性貝類(lèi)毒素(DSP)ELISA檢測(cè)試劑盒
腹瀉性貝類(lèi)毒素(DSP)ELISA檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品信息

 

概述
腹瀉性貝類(lèi)毒素檢測(cè)試劑盒的原理是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法,用于水及水產(chǎn)品中腹瀉性貝類(lèi)毒素的定量測(cè)定。岡田酸是腹瀉性貝類(lèi)毒素的一種。對(duì)于水產(chǎn)品需要做前處理,不可以直接檢測(cè)。如果需要的話陽(yáng)性樣品可以通過(guò)HPLC和GC/MS來(lái)驗(yàn)證。
保存和穩(wěn)定性
試劑盒應(yīng)保存在2-8,不要冷凍。在使用之前要把試劑盒中的溶液回復(fù)到室溫(20-25)。有效期內(nèi)試劑盒中的試劑都可以使用。
原理
試劑盒的原理是直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法,通過(guò)特異性抗體來(lái)識(shí)別岡田酸。當(dāng)樣品中含有岡田酸時(shí),樣品中的岡田酸與岡田酸酶結(jié)合物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合溶液中的岡田酸抗體。岡田酸抗體與包被在微孔板上的羊抗鼠二抗結(jié)合。經(jīng)過(guò)一步洗滌加入底物溶液,產(chǎn)生有色反應(yīng)。產(chǎn)生的綠色的顏色深度與樣品中岡田酸的含量成反比。加入反應(yīng)停止液后使顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)定吸光度值。通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)計(jì)算樣品中岡田酸的含量。
7.試劑盒特性
敏感性:1.7ng/ml
重復(fù)性:標(biāo)準(zhǔn)的變異系數(shù)小于10%,樣品的變異系數(shù)小于15%
特異性:
腹瀉性貝類(lèi)毒素檢測(cè)試劑盒能檢測(cè)Okadaic acid及其它DSP,它們的結(jié)合程度是不同,以下表格中展示的是相關(guān)值及交叉反映率(%CR),以下所有濃度均為ppb級(jí)。

 類(lèi)
% CR
 類(lèi)
% CR
Okadaic Acid (DTX)
*
Dinophysistoxins DTX-2
50%
Dinophysistoxins DTX-1
50%
 
 

 
 
樣品:水樣和貝類(lèi)產(chǎn)品
A.試劑盒組成:
1、包被二抗的微孔板(羊抗兔)
2、標(biāo)準(zhǔn)(7種)00.1、0.20.5、1.0、2.05.0、ng/ml
3岡田酸抗體溶液(兔抗岡田酸)6ml
4、岡田酸酶標(biāo)記物6ml
5、樣品稀釋液(10倍濃縮)25ml,用于稀釋樣品
6、5x 濃縮洗液100ml
7、顯色液(底物)TMB,16ml
8、終止液12ml
B.操作步驟
1、在對(duì)應(yīng)的微孔中加入100μL的標(biāo)準(zhǔn)和樣品(*做2-3個(gè)重復(fù))
2、每個(gè)測(cè)試孔都加入50 μL岡田酸酶標(biāo)記物溶液。
3、每個(gè)測(cè)試孔都加入50 μL岡田酸抗體溶液,用封口膜把微孔板蓋上,輕輕的震蕩微孔板30秒使里面的液體混勻。不要使液體灑出。
4、在室溫下孵育60分鐘。
5、孵育完成后,把封口膜取掉,將微孔中的溶液用力地倒入水槽中,用1 X的洗液洗板3次,每孔每次至少加入250 μL1 X的洗液。拍板,去掉殘留的洗液。
6、每個(gè)測(cè)試孔加入150μL的顯色液(底物)。室溫孵育20-30分鐘,此步驟避免太陽(yáng)光照射。
7、每個(gè)測(cè)試孔加入100μL終止液。
8、用酶標(biāo)儀在450nm 下讀取每個(gè)孔的吸光度值(OD)(在加入終止液15分鐘內(nèi)完成)。
C 結(jié)果分析
結(jié)果分析可以利用商業(yè)ELISA分析軟件(4-parameters,Logit/Log)。手工計(jì)算可以先計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值的平均值,然后計(jì)算每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的%B/B0(用其它標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值除以零標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值乘以*)。以每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的%B/B0做Y軸,以每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的岡田酸的濃度做X軸構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過(guò)利用標(biāo)準(zhǔn)曲線,把樣品的%B/B0代入標(biāo)準(zhǔn)可以計(jì)算出樣品中岡田酸的濃度。樣品中岡田酸的含量小于0.1 ppb認(rèn)為陰性。當(dāng)樣品中岡田酸的含量大于5.0 ppb要稀釋后再測(cè)定
D 結(jié)果分析
可以利用商業(yè)ELISA軟件程序比如Logit/Log or 4-Parameter 來(lái)評(píng)價(jià)ELISA結(jié)果。也可以通過(guò)計(jì)算每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的%B/B0值,以%B/B0為y軸、呋喃唑酮為x軸作一標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品濃度可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)計(jì)算。當(dāng)樣品中的呋喃唑酮濃度低于標(biāo)準(zhǔn)1(0.0125 ng/mL)時(shí),認(rèn)為樣品中呋喃唑酮的濃度小于0.05 ppb。樣品表現(xiàn)的濃度高于標(biāo)準(zhǔn)6(0.5 ng/mL)時(shí)要經(jīng)過(guò)稀釋后再測(cè)定。
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